應(yīng)用SELDI-TOF-MS篩選急性淋巴細(xì)胞白血病患兒血清生物標(biāo)志物的研究.pdf

1、目的： 因早期癥狀不明顯，小兒急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphocytic leukemia (ALL) )診斷時(shí)間均較晚，經(jīng)正規(guī)化療，兒童ALL的治愈率接近80％，但仍有約20％的ALL患兒復(fù)發(fā)，其主要原因是緩解時(shí)體內(nèi)仍殘留一定數(shù)量的白血病細(xì)胞，又稱微量殘留病(minimal residual disease (MRD))。我們用表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜 (surface enhanced laser des

2、orption/ionization-time of flight-mass spectrometry SELDI-TOF-MS)) 技術(shù)結(jié)合蛋白芯片檢測(cè)ALL患兒治療前、治療完全緩解（complete remission (CR) ）及正常兒童血清蛋白質(zhì)譜的差異性表達(dá)，以發(fā)現(xiàn)ALL的早期診斷的生物標(biāo)志物以及監(jiān)測(cè)微量殘留病的新方法。 方法： 應(yīng)用表面增強(qiáng)激光解吸離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜（SELDI-TOF-MS) 儀檢測(cè)結(jié)合在

3、蛋白質(zhì)芯片上的血清蛋白質(zhì)，獲得27例急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)，10例為ALL完全緩解（CR），21例正常對(duì)照者血清蛋白表達(dá)指紋圖譜，并用Biomarker Wizard和Biomarker Paterns System 5.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，建立診斷模型。 結(jié)果： 在質(zhì)荷比為1000～20000范圍內(nèi)，共檢測(cè)到三組間有差異的蛋白質(zhì)峰62個(gè)，其中ALL組與正常對(duì)照組比較有顯著差異（Ｐ<0.01）的蛋白質(zhì)峰有30個(gè)，

4、高表達(dá)的蛋白質(zhì)峰22個(gè)，低表達(dá)的蛋白質(zhì)峰8個(gè);ALL組與CR組間有顯著差異（Ｐ<0.01）的蛋白質(zhì)峰有11個(gè)，高表達(dá)的蛋白質(zhì)峰有9個(gè)，低表達(dá)的蛋白質(zhì)峰2個(gè);ALL-CR組與正常對(duì)照組間有顯著差異（Ｐ<0.01）的蛋白質(zhì)峰有5個(gè)，高表達(dá)的蛋白質(zhì)峰4個(gè)，低表達(dá)的蛋白質(zhì)峰1個(gè); 用Biomarker wizard 軟件對(duì)三組血清樣本的蛋白質(zhì)指紋圖譜進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)有最有意義的蛋白質(zhì)中，質(zhì)荷比為2770.43的蛋白質(zhì)最有意義。分析21例正常對(duì)照和

5、27例ALL患兒血清的蛋白質(zhì)組成，用質(zhì)荷比為2770.43一個(gè)蛋白質(zhì)組成生物標(biāo)志物，這個(gè)生物標(biāo)志物的分析數(shù)據(jù)共產(chǎn)生2個(gè)終結(jié)點(diǎn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該兩個(gè)終結(jié)點(diǎn)可將正常兒童與ALL患兒準(zhǔn)確分組，錯(cuò)誤分組率為0％。 結(jié)論： 1、ALL患兒與正常兒童血清蛋白質(zhì)組學(xué)水平有顯著差異； 2、質(zhì)荷比（m/z）值為2770.43的蛋白質(zhì)在ALL患兒血清蛋白質(zhì)譜中波峰強(qiáng)度明顯升高,可能是ALL的生物標(biāo)志物； 3、SELDI-TOF-M