急性淋巴細(xì)胞白血病患兒血小板蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、 目的 急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的血液系統(tǒng)腫瘤,出血是常見(jiàn)癥狀及死因之一,引起出血的機(jī)制復(fù)雜,其中最主要原因是血小板減少。ALL患兒血小板數(shù)量減少的同時(shí),可能存在其功能異常。目前關(guān)于ALL患兒血小板功能的研究較少,其對(duì)出血影響的機(jī)制尚不完全清楚。本實(shí)驗(yàn)旨在應(yīng)用血小板蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析兒童 ALL 狀態(tài)下血小板蛋白質(zhì)差異表達(dá),并對(duì)這些差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步的研究和篩選,以期尋找到ALL患兒血小板功能相關(guān)的血小板特異

2、性蛋白質(zhì),探討ALL時(shí)血小板功能異常的分子機(jī)制,以便早期采取積極措施干預(yù)ALL患者的出血,從而改善預(yù)后。方法 應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片CM10及表面激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(SELDI-TOF-MS)技術(shù)獲得ALL患兒27例(ALL組)、ALL誘導(dǎo)緩解治療達(dá)到完全緩解患兒25例(ALL-CR1組)及正常對(duì)照組27例的整套血小板蛋白質(zhì)譜,采用Ciphergen公司Biomarker Wizard和Biomarker Pattern System

3、5.0軟件對(duì)蛋白質(zhì)譜進(jìn)行差異蛋白分析,篩選出有顯著差異的蛋白質(zhì)。結(jié)果 (1)在質(zhì)荷比2000~20000范圍內(nèi),ALL組與正常對(duì)照組比較血小板質(zhì)譜中有176個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)峰(p<0.05),高表達(dá)有25個(gè),低表達(dá)有151個(gè)。其中存在穩(wěn)定表達(dá)且變異系數(shù)小的蛋白質(zhì)峰有9個(gè)：包括高表達(dá)2個(gè),荷質(zhì)比(M/Z)分別為2496.9和4287.9；低表達(dá)7個(gè),荷質(zhì)比(M/Z)分別為7881.2、4091.3、3149.9、2365.1、9414.

4、1、5252.3、2280.7。(2)ALL組與ALL-CR1組比較血小板質(zhì)譜中有112個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)峰(p<0.05),其中高表達(dá)有15個(gè),低表達(dá)有97個(gè),存在穩(wěn)定表達(dá)且變異系數(shù)小的蛋白質(zhì)峰有6個(gè)：包括高表達(dá)2個(gè),荷質(zhì)比(M/Z)分別為2496.9和4287.9；低表達(dá)4個(gè),荷質(zhì)比(M/Z)分別為9414.1、7881.2、3149.9、2280.7。(3)ALL-CR1組與正常對(duì)照組比較,未出現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的高表達(dá)蛋白質(zhì)峰(p

5、>0.05),但仍有69個(gè)顯著低表達(dá)的蛋白質(zhì)峰(p<0.05)。(4)數(shù)據(jù)庫(kù)分析 ALL 組與正常對(duì)照組顯著差異的 9 個(gè)蛋白質(zhì)峰,表達(dá)上調(diào)的兩種蛋白分別為內(nèi)皮素-1 和大內(nèi)皮素-1,表達(dá)下調(diào)的蛋白為血小板第四因子、凝血酶輕鏈、垂體腺苷酸環(huán)化酶多肽27、纖維蛋白原β鏈和三種未知蛋白,這些蛋白質(zhì)可能與血小板信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、粘附、聚集及活化等功能相關(guān)。結(jié)論 (1) ALL患兒與正常對(duì)照組外周血血小板蛋白質(zhì)組學(xué)水平有顯著差異；(2)ALL組與ALL