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1、目的:研究重組人WISP3蛋白(rhWISP3)對(duì)人永生化軟骨細(xì)胞T/C-28a2增殖和分化的作用,初步探討是否通過IGF-1信號(hào)通路發(fā)生作用。 方法:分別應(yīng)用不同濃度rhWISP3干預(yù)人永生化軟骨細(xì)胞T/C-28a2,用[<'3>H]-脫氧胸腺嘧啶([<'3>H]-TdR)攝入法測(cè)定細(xì)胞的增殖活性。用rhWISP3與重組人IGF-1蛋白(rh IGF-1)同時(shí)干預(yù)T/C-28a2細(xì)胞,用[<'3>]-TdR攝入法測(cè)定細(xì)胞的增殖
2、活性。用免疫印記法檢測(cè)不同濃度WISP3蛋白干預(yù)的T/C-28a2細(xì)胞Ⅱ型膠原的表達(dá)變化。用IGF-1信號(hào)通路阻斷劑JBl干預(yù)細(xì)胞后,用免疫印記法檢測(cè)WISP3蛋白對(duì)T/C-28a2細(xì)胞Ⅱ型膠原的表達(dá)的影響。 結(jié)果:[<'3>H]-TdR攝入法測(cè)定細(xì)胞的增殖活性, WISP3蛋白對(duì)軟骨細(xì)胞增殖活性無(wú)明顯影響。IGF-1蛋白明顯促進(jìn)T/C-28a2細(xì)胞增殖,WISP3對(duì)IGF-1促T/C-28a2細(xì)胞增殖的作用無(wú)影響。免疫印記顯示
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