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文檔簡(jiǎn)介
1、【目的】:觀察不同強(qiáng)度的機(jī)械牽張應(yīng)力刺激對(duì)體外培養(yǎng)的小兒指骨骺板軟骨細(xì)胞增殖分化和凋亡的影響。
【方法】:體外分離培養(yǎng)多指患兒切除多指的指骨骺板軟骨細(xì)胞,甲苯胺藍(lán)染色及Ⅱ型膠原免疫組化染色予以鑒定,用四點(diǎn)彎曲細(xì)胞力學(xué)加載裝置分別對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同強(qiáng)度的周期性牽張應(yīng)力刺激(刺激強(qiáng)度分別為2000μstrain、4000μstrain,刺激時(shí)間6h、刺激頻率0.5Hz),未刺激組為對(duì)照組,采用熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞的細(xì)胞
2、增殖核抗原(PCNA)、軟骨特征性細(xì)胞外基質(zhì)(COLII、COLX)、凋亡相關(guān)基因(BAX、BCL-2)及PThrP的mRNA表達(dá)情況。
【結(jié)果】:在2000μstrain的周期性牽張應(yīng)力刺激下,小兒指骨骺板軟骨細(xì)胞COLII、COLX、PThrPmRNA表達(dá)水平明顯增強(qiáng)并高于對(duì)照組(P<0.05),PCNAmRNA表達(dá)水平也增加但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而在4000μstrain的周期性牽張應(yīng)力刺激下,PCNA、C
3、OLII、PThrPmRNA表達(dá)明顯下降并低于對(duì)照組(P<0.05),COLXmRNA表達(dá)水平稍有下降但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),且BCL-2、BAXmRNA表達(dá)水平的比值與對(duì)照組相比逐漸升高,刺激強(qiáng)度越大,比值升高越明顯,2000μstrain和4000μstrain刺激下差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
【結(jié)論】:小兒指骨骺板軟骨細(xì)胞的增殖分化和凋亡受機(jī)械牽張應(yīng)力所調(diào)節(jié),適當(dāng)?shù)臓繌垜?yīng)力刺激能有效促進(jìn)其增殖分化,
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