HCMV感染對HEL細胞周期與MCM2、MCM8表達的影響.pdf

1、目的：研究人類巨細胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染對HEL細胞周期、MCM2和MCM8表達的影響，探討HCMV感染可能的發(fā)病機制。 方法：用HCMV感染血清饑餓法同步化的人胚肺成纖維細胞(human embryonic lung fibroblastic，HEL)。HCMV感染作為感染組，同時設非感染組為對照組，用流式細胞儀檢測細胞周期。用倒置相差顯微鏡觀察兩組細胞形態(tài)學改變至感染后7天。于HC

2、MV感染后12h(hour)、24h、48h、72h和96h收獲細胞，提取總RNA，采用半定量逆轉錄一聚合酶鏈反應技術(RT-PCR)檢測HEL細胞MCM2和MCM8的表達水平。 結果 1、非感染組未發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)學改變。感染組感染HCMV 48h后，可見細胞變形顯著，部分梭形細胞變成突起豐富的單個球形細胞，72h后病變更加明顯，細胞絕大部分變成圓形、橢圓形，胞體及胞核增大，胞質混濁，細胞透光性降低。7天時可見所有感染細胞

3、均發(fā)生類似病變。 2、感染組在感染后12h有71.4﹪的HEL細胞處于G<,1>期，24h仍有70.2﹪的細胞處于G<,1>期。非感染組在感染后12h有63.5﹪的HEL細胞處于G1期，24h有45.5﹪的細胞處于G<,1>期。兩組比較，均有顯著性差異(P<0.01)。 3、12h、24h、48h、72h、96h兩組細胞MCM2和MCM8 mRNA表達水平均有顯著性差異(P<0.05)，12h和24h時感染組表達水平低于

4、非感染組，48h、72h、96h時感染組表達水平明顯高于非感染組。在上述5個時間點中，非感染組MCM2、MCM8 mRNA表達水平的高峰出現(xiàn)在感染后24h，而感染組表達水平的高峰則出現(xiàn)在感染后48h，較之有明顯滯后。 結論： 1、HCMV感染影響了HEL細胞周期，大部分HEL細胞停滯在G<,1>期。 2、HCMV感染能誘導MCM2及MCM8 mRNA表達異常，使HEL細胞MCM2及MCM8 mRNA表達水平遲滯，這可能是