多種分子標(biāo)記物在癌癥檢測中的研究.pdf

1、對于癌癥而言，早發(fā)現(xiàn)早治療，才能有效的提高生存率。研究發(fā)現(xiàn)在癌癥中一些物質(zhì)如基因、蛋白等會出現(xiàn)明顯的變化，它們作為腫瘤標(biāo)記物在對腫瘤的篩選、診斷和判斷預(yù)后以及實現(xiàn)個體化治療中扮演著重要的角色。所以，發(fā)現(xiàn)新型的腫瘤標(biāo)記物并建立準(zhǔn)確的檢測方法對于癌癥的判斷來說都具有重要意義。
　　 第一章，本章首先介紹了25-羥基維生素D與腺癌的關(guān)系，在整合了25-羥基維生素D與腺癌之間的流行病學(xué)以及分子機(jī)制研究后創(chuàng)新性提出了25-羥基維生素D作為

2、預(yù)測腺癌發(fā)生風(fēng)險的標(biāo)記物的可能性，并通過建立的25-羥基維生素D檢測方法對129名不同類型的腺癌病人以及81名非腺癌對照組進(jìn)行了臨床驗證(36.5±10.7 nmol/L vs81.4±19.8 nmol/L)，結(jié)果表明腺癌病人的25-羥基維生素D含量符合國際上維生素D缺失標(biāo)準(zhǔn)（50 nmol/L以下）。之后介紹了另一種腫瘤標(biāo)記物融合基因在白血病診斷中的重要性，其中以慢性粒細(xì)胞白血病中的費城染色體為例，探析了其融合基因結(jié)構(gòu)以及所形成的融

3、合蛋白功能，總結(jié)了慢性粒細(xì)胞白血病的各種治療方式、分型診斷方法，匯總了目前融合基因的檢測方法，突顯融合基因檢測在臨床上的重要性。
　　 第二章，基于目前融合基因檢測方法的優(yōu)缺點，以慢性粒細(xì)胞白血病中BCR-ABL融合基因為切入點，利用多重RT-PCR技術(shù)，結(jié)合毛細(xì)管電泳檢測技術(shù)，建立相應(yīng)的檢測方法。采用重疊延伸法構(gòu)建了BCR-ABL對應(yīng)的陽性質(zhì)粒e1a2，e13a2和e14a2用以驗證引物的擴(kuò)增效果，并可作為臨床陽性標(biāo)準(zhǔn)品。為了

4、滿足在一個PCR反應(yīng)中就可以將三種融合形式都檢測出的要求，進(jìn)行了所有引物的混合，通過PCR反應(yīng)體系以及條件的優(yōu)化，建立了多重PCR檢測技術(shù)。并與毛細(xì)管電泳（CE）技術(shù)相結(jié)合，可快速、準(zhǔn)確的檢測樣本。將構(gòu)建的方法在慢性粒細(xì)胞白血病樣本上進(jìn)行了臨床驗證，結(jié)果均為陽性，與測序結(jié)果以及臨床分析結(jié)果一致。該方法方便快捷、價格低廉，并能清晰的判斷融合基因融合類型，可作為染色體核型分析的輔助手段，應(yīng)用于白血病臨床初期的分型診斷，并有助于預(yù)后以及療效評