六味地黃方含藥血清及其入血成分對大鼠前脂肪細胞增殖、分化的影響.pdf

1、目的 探討六味地黃方含藥血清及其入血成分對大鼠前脂肪細胞內(nèi)環(huán)腺苷酸、環(huán)鳥苷酸及其增殖、分化、分化過程中過氧化物酶增殖物活化受體PPAR γ 2 mRNA表達的影響。 方法 一、采用RP—HPLC法對六味地黃方含藥血清中3入血成分進行鑒認(rèn)及含量測定。二、培養(yǎng)大鼠皮下脂肪的前脂肪細胞，在其增殖與分化的不同階段分別加六味地黃含藥血清及其入血3成分，觀察其對大鼠前脂肪細胞的增殖，分化過程中的磷酸甘油脫氫酶(GPDH)和細胞內(nèi)脂肪積聚

2、的作用。三、采用競爭性蛋白結(jié)合分析方法測定大鼠前脂肪細胞的cAMP、cGMP含量。四：應(yīng)用半定量RT—PCR技術(shù)，觀察不同濃度六味地黃超微含藥血清對前脂肪細胞分化過程中PPAR<,γ2>mRNA表達的影響。 結(jié)果 實驗發(fā)現(xiàn)六味地黃方(湯、丸、超微)含藥血清中含有3個入血成分：馬錢苷、芍藥苷、丹皮酚，它們在陰虛病理狀態(tài)下血清中3種成分的含量比正常狀態(tài)下的要高，且馬錢苷、芍藥苷、丹皮酚的含量都以超微最高，其次為丸劑、湯劑。六味地黃

3、方對大鼠前脂肪細胞的增殖有促進作用，并通過降低PPAR Y基因的表達來抑制其分化過程中的GPDH的升高，對分化過程中的脂肪積聚有明顯的促進分解作用，使前脂肪細胞分化為成熟脂肪細胞的過程受到抑制，其主要有效成分是馬錢苷、芍藥苷、 丹皮酚，但其抑制作用以芍藥苷最佳，促進作用以馬錢苷最佳；該方還能降低前脂肪細胞內(nèi)cAMP的水平，其主要有效成分是馬錢苷。此外，六味地黃方湯、丸、超微三劑型中，超微飲片不但很好地保留了傳統(tǒng)飲片的上述作用，而且作用

4、強于六味地黃湯劑、丸劑。結(jié)論 首先，六味地黃方對大鼠前脂肪細胞增殖、分化的作用，可望在分子水平與脂肪細胞相關(guān)疾病的基因治療上提供較特異的靶點藥物，有助于進一步探討六味地黃方對人體脂肪代謝的影響；同時表明該方滋陰作用的機制之一可能是通過其含藥血清中的主要成分馬錢苷降低前脂肪細胞內(nèi)cAMP濃度，作用于cAMP受體，以芍藥苷、丹皮酚、馬錢苷為主要有效成分促進該細胞的增殖并抑制其分化，使細胞功能也隨之發(fā)生明顯變化，進而調(diào)節(jié)基礎(chǔ)代謝之一的脂肪代謝