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文檔簡介
1、目的: (1)原代培養(yǎng)人大網膜前脂肪細胞并進行鑒定。 (2)觀察離體狀態(tài)下人大網膜前脂肪細胞增殖和分化的過程。 (3)觀察性激素對人大網膜前脂肪細胞增殖與分化的影響。 方法: (1)膠原酶消化法原代分離培養(yǎng)人大網膜前脂肪細胞。 (2)觀察原代培養(yǎng)人大網膜前脂肪細胞增殖和分化過程:以四甲基偶氮唑鹽(MTT)法觀察離體狀態(tài)下人大網膜前脂肪細胞增殖狀態(tài)并繪制曲線;油紅O染色法觀察離體狀態(tài)下人大網
2、膜前脂肪細胞分化狀態(tài)并繪制曲線。 (3)觀察性激素對大網膜前脂肪細胞增殖和分化的影響:以四甲基偶氮唑鹽(MTT)方法檢測人大網膜前脂肪細胞增殖的變化,以油紅O染色檢測人大網膜前脂肪細胞分化的變化。 (4)統(tǒng)計學處理:用SPSS13.0對實驗數據進行分析處理,采用均數±標準差(x±s)表示。P<0.05有統(tǒng)計學意義。 結果: (1)成功地原代培養(yǎng)了人大網膜前脂肪細胞。 培養(yǎng)出的梭形細胞成分均一,增殖
3、旺盛,分化率高。經形態(tài)學動態(tài)變化的觀察、生長曲線及油紅O脂肪染色抽取法測定,證明是功能活躍的前脂肪細胞。 (2)雌二醇對人大網膜前脂肪細胞的增殖有促進作用,對分化過程中的脂肪積聚有抑制作用。睪酮對人大網膜前脂肪細胞的增殖無明顯作用,抑制人大網膜前脂肪細胞分化。 結論: (1)使用膠原酶消化的方法分離并原代培養(yǎng)了人大網膜前脂肪細胞,為研究各種細胞因子或激素對大網膜前脂肪細胞的增殖或分化的作用提供了實驗細胞模型。
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