半枝蓮含藥血清對大鼠肝星狀細(xì)胞增殖與凋亡的影響.pdf

1、目的：本實驗觀察半枝蓮醇提物不同濃度的含藥血清對大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）增殖、凋亡及細(xì)胞周期的影響，探討半枝蓮抗肝纖維化的作用及機制。為開發(fā)利用盛產(chǎn)于廣西的藥用植物半枝蓮治療肝纖維化奠定理論和實驗的基礎(chǔ)。
　　方法：體外培養(yǎng) HSC-T6細(xì)胞株，移入孔板后按孔數(shù)將細(xì)胞分成5組：空白血清對照組(第1組)、半枝蓮含藥血清低濃度組(第2組)、半枝蓮含藥血清中濃度組(第3組)、半枝蓮含藥血清高濃度組(第4組)、秋水仙堿含藥血清陽性對

2、照組(第5組)。按各組要求往細(xì)胞孔內(nèi)加入相應(yīng)的工作液。培養(yǎng)孵育48h后，用四氮噻唑藍(lán)(MTT)比色法測定細(xì)胞的吸光度值，計算增殖抑制率。用流式細(xì)胞術(shù)(PI染色法)檢測各周期細(xì)胞的DNA含量。用流式細(xì)胞術(shù)(Annexin-v-FITC/PI雙染色法)檢測細(xì)胞各期凋亡情況。
　　結(jié)果：1. MTT：與空白血清組對照，低、中、高濃度半枝蓮含藥血清組OD值顯著降低，增殖抑制率明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其48h的增殖抑制率

3、分別為14.1％、23.6%、47.3%，增殖率呈濃度依賴性（P<0.05）。2. PI染色：與空白血清組對照，低、中、高濃度半枝蓮含藥血清組G0/G1期HSC-T6細(xì)胞百分比明顯增加(P＜0.05)，S+G2/M期HSC-T6細(xì)胞百分比明顯減少(P＜0.05)，48h的S期+G2/M期細(xì)胞總數(shù)百分比分別為53.5%、47.6%、39.7%，呈濃度依賴性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3.ANNEXIN V-FITC/PI雙染色：與

4、空白血清組對照，低、中、高濃度半枝蓮含藥血清組48h的總凋亡細(xì)胞百分比分別為7.75%、15.57%、31.34%。其誘導(dǎo)凋亡的能力呈濃度依賴性,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。4.高濃度半枝蓮含藥血清組對HSC-T6細(xì)胞的增殖抑制率比秋水仙堿含藥血清組高、S+G2/M期HSC-T6細(xì)胞百分比較秋水仙堿含藥血清組少，48h的總凋亡細(xì)胞百分比較秋水仙堿含藥血清組高，差異均具有顯著性(P<0.05)。
　　結(jié)論：1.半枝蓮醇提物能抑