2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、  目的
  1.改進(jìn)大鼠HSC的分離方法。
  2.探討姜黃素對(duì)HSC增殖與凋亡的影響。
  方法
  二氯亞甲基二磷酸鹽處理SD大鼠后,原位膠原酶灌注結(jié)合密度梯度離心法分離大鼠HSC,計(jì)算細(xì)胞得率和細(xì)胞活力,采用熒光顯微鏡觀察HSC自發(fā)熒光、Desmin免疫組化染色進(jìn)行HSC的鑒定,內(nèi)源性過氧化物酶染色檢測(cè)枯否細(xì)胞。
  肝星狀細(xì)胞株HSC-T6與姜黃素孵育后,MTT比色法檢測(cè)姜黃素對(duì)HSC增殖的影響,

2、流式細(xì)胞術(shù)分析姜黃素對(duì)HSC細(xì)胞周期的影響,流式細(xì)胞術(shù)、透射電鏡和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)細(xì)胞凋亡。
  結(jié)果
  HSC的得率為2×107~3×107細(xì)胞/大鼠,活率在95%以上,在328nm激發(fā)光下自發(fā)藍(lán)綠色熒光,Desmin陽性細(xì)胞在90%以上,未檢測(cè)到內(nèi)源性過氧化物酶陽性細(xì)胞。
  20~100μmol/L姜黃素可以抑制HSC增殖(p<0.05),半數(shù)致死量為89μmol/L。以20、40、60μmol/L姜黃素作用

3、24h后,細(xì)胞周期分析發(fā)現(xiàn)S期細(xì)胞減少,G2/M期細(xì)胞顯著增加(P<0.05);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)到明顯的亞G1峰,各組的凋亡指數(shù)(%)分別是15.3±1.88,26.7±2.79,37.6±4.38,與對(duì)照組(1.9±0.64)相比,差異有顯著性(P<0.01);透射電鏡觀察到細(xì)胞皺縮、核染色質(zhì)濃縮沿核膜排列和凋亡小體形成等細(xì)胞凋亡特征性的改變;瓊脂糖凝膠電泳可以見到明顯的DNA梯狀帶形成。以40 μmol/L姜黃素作用12、24、36、

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