姜黃素聯(lián)合伊馬替尼對脊索瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響及機制初步研究.pdf

1、目的：
　　觀察姜黃素聯(lián)合伊馬替尼對脊索瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響，并初步探討其作用機制。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)脊索瘤細(xì)胞系 CM-319，給予不同濃度的伊馬替尼和（或）姜黃素作用24-72h，WST-1檢測細(xì)胞的增殖情況；實時定量PCR檢測伊馬替尼和（或）姜黃素作用CM-319細(xì)胞24h后血小板源性生長因子受體-β（PDGFR-β）mRNA的表達(dá)水平；Western blot檢測PDGFR-β、bcl-2、caspa

2、se-3蛋白的表達(dá)以及 Akt的磷酸化；流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)果：
　　1、隨著伊馬替尼和姜黃素濃度的增加，各單藥及兩者聯(lián)合使用對CM-319細(xì)胞的生長抑制作用逐漸加強。當(dāng)兩者聯(lián)合使用對 CM-319細(xì)胞存活率為50％時，伊馬替尼和姜黃素的聯(lián)合系數(shù)為0.86。
　　2、10μmol/L姜黃素并不能下調(diào)CM-319細(xì)胞表達(dá)PDGFR-βmRNA，但可抑制PDGFR-β蛋白的表達(dá)，且隨著其濃度的遞增，mRNA和蛋

3、白表達(dá)水平逐漸降低。1μmol/L伊馬替尼對PDGFR-β mRNA以及蛋白表達(dá)無明顯影響。當(dāng)其聯(lián)合10μmol/L姜黃素作用24h后，PDGFR-βmRNA以及蛋白表達(dá)水平顯著降低。
　　3、采用1μmol/L伊馬替尼和10μmol/L姜黃素聯(lián)合處理細(xì)胞后，磷酸化Akt的水平顯著降低。
　　4、單純給予1μmol/L伊馬替尼或10μmol/L姜黃素處理對CM-319細(xì)胞凋亡無明顯影響。給予20μmol/L姜黃素處理后，CM

4、-319細(xì)胞凋亡有所增加，但給予1μmol/L伊馬替尼和10~20μmol/L姜黃素共同作用后，凋亡細(xì)胞比例顯著增高。同時，caspase-3的含量也顯著增高，而bcl-2有所降低。
　　結(jié)論：
　　1．伊馬替尼聯(lián)合姜黃素可抑制脊索瘤細(xì)胞增殖可能與下調(diào)PDGFR-β的表達(dá)及抑制PI3K/Akt的磷酸化有關(guān)；
　　2．姜黃素聯(lián)合伊馬替尼促進(jìn)CM-319細(xì)胞凋亡可能是通過降低bcl-2，并上調(diào)caspase-3的表達(dá)而實現(xiàn)