冠通方及其拆方含藥血清對大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖與凋亡影響研究.pdf

1、冠心病是人類健康的頭號殺手之一，冠狀動脈支架植入術(shù)已成為目前治療冠心病最有效的手段之一，但術(shù)后6個月內(nèi)發(fā)生再狹窄率仍有20％—30%，嚴(yán)重影響其遠(yuǎn)期療效。冠通方是以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，在系統(tǒng)分析支架內(nèi)再狹窄的病因病機(jī)的基礎(chǔ)上，導(dǎo)師楊力強(qiáng)及一些專家組成的課題組根據(jù)多年的臨床經(jīng)驗以及結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論和有關(guān)藥理學(xué)研究成果所創(chuàng)制。前期的臨床研究表明，冠通方防治冠脈支架植入術(shù)后再狹窄有較好的臨床療效。
　　目的：通過冠通方及其拆方含藥血清對血管

2、緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖及凋亡的影響研究，證實冠通方配伍的合理性及探討防治再狹窄的作用機(jī)理。為開發(fā)防治支架內(nèi)再狹窄的有效中藥制劑提供實驗依據(jù)。
　　方法：選用大鼠血管平滑肌細(xì)胞，用血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)其增殖，以冠通方及其拆方含藥血清分別作用于大鼠血管平滑肌細(xì)胞，MTT比色法測定細(xì)胞的吸光度值，計算其增殖抑制率；用流式細(xì)胞術(shù)PI染色法檢測各周期的DNA含量及細(xì)胞晚期凋亡的情況；用流式細(xì)胞術(shù) ANNEXIN V-PE/7-AA

3、D雙染色法精確測算細(xì)胞各階段凋亡情況。
　　結(jié)果：
　　1.MTT:模型組OD值與空白組相比明顯升高(P＜0.01)，冠通方組、活血祛瘀組、益氣養(yǎng)陰組、清熱化痰組 OD值與模型組相比均顯著降低(P＜0.05)，其48h的增殖抑制率分別為24.1%、22.8%、17.8%、14.1%。
　　2. PI染色：模型組與空白對照組相比，GO/G1期血管平滑肌細(xì)胞百分比明顯減少(P＜0.01)，S期+G2/M期血管平滑肌細(xì)胞百分

4、比明顯增加(P＜0.01)，晚期凋亡率顯著減少(P＜0.01)。冠通方組、活血祛瘀組、益氣養(yǎng)陰組、清熱化痰組各藥物組與模型組相比，G0/G1期血管平滑肌細(xì)胞百分比明顯增加(P＜0.05)，S+G2/M期血管平滑肌細(xì)胞百分比明顯減少(P＜0.05)，晚期凋亡率明顯增加(P＜0.05)，48h的S期+G2/M期細(xì)胞總數(shù)百分比分別為29.8%、38.3%、42.7%、41.5%；晚期凋亡率分別為25.7%、24.4%、19.3%、16.1%。

5、
　　3. ANNEXIN V-PE/7-AAD雙染色：模型組與空白對照組相比，早期及晚期細(xì)胞凋亡率明顯降低(P<0.01)，與模型組相比，冠通方組、活血祛瘀組、益氣養(yǎng)陰組、清熱化痰組各藥物組早期及晚期凋亡率均明顯升高(P＜0.05)，48h的總凋亡細(xì)胞百分比分別為32.5%、26.7%、21.3%、17.4%。
　　結(jié)論：
　　1.冠通方防治ISR可能與抑制VSMC的增殖、影響其周期、誘導(dǎo)其凋亡有關(guān)。
　　2.