新生隱球菌莢膜多糖血清型D的合成研究.pdf

1、近年來，隨著癌癥放療、化療和器官移植及介入治療患者人數(shù)的增加，臨床上廣譜抗生素、皮質(zhì)激素和免疫抑制劑的廣泛使用，以及艾滋病的迅速蔓延，使臨床深部真菌感染病例急劇增加，全球范圍內(nèi)的真菌感染發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，其中新生隱球菌就是常見的一種致病菌。新生隱球菌感染是由隱球菌屬中的新生變種、格特變種和上海變種等引起的一種深部真菌感染。新生隱球菌與其它真菌一樣，具有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜。研究發(fā)現(xiàn)新生隱球菌的細(xì)胞壁外的莢膜多糖與新生隱球菌的毒性和感染力

2、是密切相關(guān)的，莢膜多糖有兩種類型，其中含量最多的是葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖(glucuronoxylomannan，GXM)。甘露糖三聚體構(gòu)成GXM的基本重復(fù)單位（分子量為百萬），這種骨架上的甘露糖可以被葡萄糖醛酸和不同量的木糖取代，D型血清型的木糖與甘露糖的比值為1∶3，而C型血清型的比值為4∶3。GXM上的一小部分糖殘基可以被乙?；?，替代物量不同在抗原性方面有重要的意義。GXM的抗原特性已經(jīng)成為抗新生隱球菌感染疫苗研究的重要連接片段。

3、與純化的莢膜多糖對照，多糖-蛋白復(fù)合物具有較高的免疫原性，免疫接種后可以重復(fù)誘導(dǎo)出高滴度的血清。
　　 糖分子是有機(jī)體的重要組成部分，主要以糖蛋白和糖脂的形式存在于細(xì)胞表面，它不僅是有機(jī)體重要的能源和碳源，而且有廣泛的生物學(xué)功能，在細(xì)胞的識別、粘附、吞噬、信息傳遞等方面也發(fā)揮重要作用。
　　 本課題我們設(shè)計合成了新生隱球菌莢膜多糖血清型D及部分糖肽化合物，我們以葡萄糖、木糖、甘露糖為起始原料，經(jīng)過合理保護(hù)基的選擇，選擇適

4、當(dāng)?shù)穆肪€首先合成了供體Ⅰ，Ⅱ，受體Ⅰ，Ⅱ;然后通過糖基化反應(yīng)得到兩個關(guān)鍵二糖中間體16，18，將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的供體17和受體19后，兩者進(jìn)行糖連結(jié)得到四糖20，脫除端位對甲氧基苯基保護(hù)做成三氯亞胺活化酯21，再將其與受體Ⅱ糖基化反應(yīng)得到五糖分子。分別將具有一定免疫原性的糖基片斷與新生隱球菌生長、感染、侵入、粘附、吞噬、生物膜生成和毒性密切相關(guān)的蛋白片段相連。糖肽的連接方式采用了天然的GPI-CWPs的連接，即以乙醇胺作為連接基團(tuán)。目標(biāo)化