新型BRD4拮抗劑Ⅰ-BET對白血病細胞株增殖的抑制作用及其機制的探索.pdf

1、目的：本研究旨在通過分析新型BRD4拮抗劑I-BET對白血病細胞株（RS4;11、SHI-1、K562、SUP-B15、THP-1和HEL）細胞增殖、凋亡的影響，初步探討其對白血病細胞株的抑制作用及相關的機制。
　　方法：1.體外培養(yǎng)伴有MLL突變的白血病細胞株（RS4;11和SHI-1），Ph陽性白血病細胞株（K562和SUP-B15），急性髓系白血病細胞株（THP-1和HEL）;2.白血病細胞株（RS4;11、SHI-1、K5

2、62、SUP-B15、THP-1和HEL）經(jīng)不同濃度的I-BET(100 nmol/L、250 nmol/L、500 nmol/L、1000nmol/L、2500 nmol/L和5000 nmol/L)處理48小時、72小時后，CCK-8法檢測其對細胞增殖抑制率的影響;3.白血病細胞株首先用三種不同I-BET濃度（RS4;11、K562、THP-1和HEL細胞經(jīng)1μmol/L、2.5μmol/L和5μmol/L的I-BET處理;SUP-

3、B15和SHI-1細胞經(jīng)0.5μmol/L、1μmol/L和2.5μmol/L的I-BET處理）處理72小時，然后利用流式細胞術檢測細胞凋亡的變化;4.白血病細胞株首先用三種不同I-BET濃度（RS4;11和K562細胞經(jīng)1μmol/L、2.5μmol/L和5μmol/L的I-BET處理;SUP-B15和HEL細胞經(jīng)0.3μmol/L、0.5μmol/L和1μmol/L的I-BET處理）處理48小時后，然后利用Western blot檢

4、測細胞中Bcl-2表達水平的變化。
　　結果：1.I-BET對白血病細胞株細胞增殖率的影響:I-BET能顯著抑制RS4;11、SHI-1、SUP-B15、THP-1和HEL細胞的增殖，但對K562細胞的抑制作用不明顯，I-BET對白血病細胞株的抑制作用呈明顯的劑量和時間依賴性;2.I-BET對白血病細胞細胞凋亡的影響:I-BET能誘導RS4;11、SHI-1、K562、SUP-B15、THP-1和HEL白血病細胞株的凋亡，并且呈劑

5、量依賴性;3.I-BET處理后對細胞Bcl-2蛋白表達水平的影響:I-BET下調RS4;11、K562和HEL細胞中Bcl-2的表達，但SUP-B15細胞實驗組和對照組未檢測到Bcl-2的表達。
　　結論：1.I-BET除了對Ph陽性白血病細胞株(K562)的抑制效果差外，其可以抑制伴有MLL突變的白血病細胞株（RS4;11和SHI-1）、急性髓細胞白血病細胞株（HEL和THP-1）、Ph陽性白血病細胞株(SUP-B15)的增殖。