小檗胺誘導(dǎo)白血病細胞株NB4細胞凋亡及其機制的研究.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文小檗胺誘導(dǎo)白血病細胞株NB4細胞凋亡及其機制的研究姓名：何智文申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師：趙小英20040501雯塑堅叁蘭堡主堂篁堡莖材料與實驗方法小檗胺粉劑由撫順中藥廠惠贈，生理鹽水調(diào)至工作母液濃度lmg／ml，實驗濃度范圍O～256“g／m1，主要實驗濃度為299／ml、499／ml、899／ml、1299／ml和1699／ml，監(jiān)測時間范圍O～72小時，主要時間監(jiān)測點為0、6、12、24、

2、48、72小時。人早幼粒細胞白血病細胞株NB4細胞由浙江大學(xué)腫瘤研究所提供。實驗共設(shè)小檗胺實驗組、空白對照組及陰性對照組。實驗以MTT法測定小檗胺對N84細胞、正常骨髓細胞的增殖抑制作用，并求得其24、48、72小時半數(shù)抑制濃度(IC。。)。形態(tài)學(xué)觀察、DNA片段分析、流式細胞儀檢測小檗胺對NB4細胞的凋亡誘導(dǎo)作用，用巢式PCR(nested—PCR)、RT—PCR和流式細胞儀(FCM)等檢測小檗胺作用NB4細胞前后融合基因PML／RA

3、Ra、Survivin基因和Caspase3的表達。結(jié)果經(jīng)不同濃度小檗胺處理NB4細胞不同時間后，細胞生長出現(xiàn)明顯的抑制，并表現(xiàn)出明顯的時間劑量依賴性。當小檗胺濃度為8ug／ml時，其抑制率從24小時的698％，增加到72小時的82，8％；作用NB4細胞48小時后，NB4細胞抑制率從4ug／m1的706％上升至8ug／ml時的825％，各組問P值均005，提示有顯著性差異。小檗胺對NB4細胞作用24、48、72小時后的IC”分別為：72