檸檬醛誘導(dǎo)急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)是急性髓系白血病的一種特殊亞型,目前治療的經(jīng)典藥物主要有全反式維甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3),它們可通過誘導(dǎo)早幼粒細(xì)胞分化、凋亡使疾病緩解,是白血病藥物治療的里程碑,但目前藥物治療中仍存在的相關(guān)毒副作用促使醫(yī)學(xué)科技工作者不斷研究開發(fā)新的藥物,以期進(jìn)一步減少副反應(yīng)及增加療效。前期文獻(xiàn)閱讀中發(fā)現(xiàn),檸檬醛(Citral)有抑制部分腫瘤細(xì)胞并誘導(dǎo)其凋亡的作用,而對正常胸腺細(xì)胞和脾細(xì)胞則只有較低毒性作用

2、或無影響。本課題組對檸檬醛于急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4細(xì)胞的作用進(jìn)行了研究,前期研究證實(shí)了檸檬醛對急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡的作用,但凋亡的具體機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究了檸檬醛誘導(dǎo)急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4凋亡的機(jī)制,為開展下一步的研究工作奠定了基礎(chǔ),也為新藥物的研制拓展了新的領(lǐng)域。
　　目的:通過檢測檸檬醛誘導(dǎo)急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4細(xì)胞凋亡過程中的相關(guān)蛋白及基因的變化,研究檸檬醛誘

3、導(dǎo)NB4凋亡作用的可能的機(jī)制,為開發(fā)新藥進(jìn)一步的研究奠定基礎(chǔ)。
　　方法:選擇對數(shù)生長期的NB4細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度的檸檬醛(5,10,20μg/ml),與NB4細(xì)胞一同培養(yǎng)48 h,同時(shí)設(shè)立不加入任何藥物的細(xì)胞對照組及終濃度為5‰的乙醇對照組。RT-PCR法檢測凋亡相關(guān)基因Bcl-2及Bax的mRNA表達(dá)變化,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)Caspase-3及核因子kappaB(NF-κB)蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果:1.濃度為

4、5,10,20μg/ml的檸檬醛分別處理NB4細(xì)胞48 h后,各組NB4細(xì)胞Bax基因表達(dá)較細(xì)胞對照組逐漸增強(qiáng)。
　　2.濃度為5,10,20μg/ml的檸檬醛分別處理NB4細(xì)胞48 h后,各組NB4細(xì)胞Bcl-2基因表達(dá)較細(xì)胞對照組逐漸減弱。
　　3.濃度為5,10,20μg/ml的檸檬醛分別處理NB4細(xì)胞48 h后,各組NB4細(xì)胞Caspase-3蛋白表達(dá)較細(xì)胞對照組逐漸增高。
　　4.濃度為5,10,20μg/m