脂氧素A4在金黃地鼠口腔粘膜潰瘍愈合中的作用研究.pdf

1、目的:脂氧素A4(LipoxinA4,LXA4)是花生四烯酸代謝產(chǎn)物,具有抗炎和促進(jìn)炎癥消退的作用。本課題通過研究脂氧素A4及相關(guān)炎癥因子在金黃地鼠口腔粘膜潰瘍病灶中的表達(dá),以及不同濃度LXA4類似物15-epi-LXA4局部應(yīng)用對金黃地鼠口腔粘膜潰瘍愈合的影響,探討LXA4對潰瘍愈合的可能作用機(jī)制,為LXA4應(yīng)用于口腔粘膜遷延不愈的炎癥類疾病提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:(1)20只金黃地鼠分為A、B、C、D四組,每組5只。以“自由

2、基損傷法”建立實(shí)驗(yàn)組金黃地鼠(A、B、C組)左頰囊口腔粘膜潰瘍模型,觀察其一般情況及潰瘍灶變化,分別于建模后第3、6、10天處死A、B、C組動(dòng)物,D組(對照組)不做任何干預(yù),于第10天處死。以上動(dòng)物處死后均切取病灶組織,做HE染色、NF-κBp65免疫組化染色及制備組織勻漿ELISA法測定LXA4、PGE2濃度。(2)30只金黃地鼠隨機(jī)分為LXA4治療組和空白對照組,每組各15只;每組動(dòng)物再隨機(jī)分為A、B、C三個(gè)批次,每批次5只。LXA

3、4治療組中的動(dòng)物,左頰粘膜作為低濃度LXA4治療組,右頰粘膜作為高濃度LXA4治療組;取對照組動(dòng)物左頰粘膜為正常對照。以“自由基損傷法”于LXA4治療組金黃地鼠左、右頰囊粘膜分別建立潰瘍模型,從建模后第1天起每日以不同濃度15-epi-LXA4溶液注射于潰瘍灶(左頰1nmol/L,右頰10nmol/L,各40μl,一日兩次)并觀察其一般情況及潰瘍灶變化;對照組A、B、C批次動(dòng)物不做任何干預(yù)。LXA4治療組和對照組A、B、C三批次動(dòng)物分別

4、于建模后第3、6、10天處死。以上動(dòng)物處死后均切取病灶組織,做HE染色、NF-κBp65免疫組化染色及制備組織勻漿ELISA法測定LXA4、PGE2濃度。以SPSS17.0對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:(1)以“自由基損傷法”建立的金黃地鼠口腔粘膜潰瘍在建模后第3天出現(xiàn)典型的潰瘍,第6天潰瘍灶出現(xiàn)修復(fù)跡象,第10天時(shí)潰瘍基本愈合;NF-κBp65免疫組化陽性率第3天組(11.25±3.28％)、第6天組(24.92±2.97%

5、)、第10天組(4.72±3.17%)均明顯高于對照組(1.74±0.21%,P<0.05),而第3天組、第6天組、第10天組間無明顯差異(P>0.05);LXA4濃度和PGE2濃度在第3天、第6天和第10天組間無顯著差異(P>0.05),但均明顯高于對照組(P<0.05);經(jīng)Pearson相關(guān)分析,LXA4濃度、PGE2濃度、NF-κBp65免疫組化評分呈正相關(guān)(P<0.05)。(2)以不同濃度15-epi-LXA4局部治療后,高濃度

6、治療組較之低濃度治療組炎癥反應(yīng)輕、修復(fù)反應(yīng)出現(xiàn)早,潰瘍愈合數(shù)量多。高、低濃度治療組NF-κBp65陽性染色率、LXA4、PGE2濃度在潰瘍愈合進(jìn)程中均隨潰瘍的愈合不同程度下降。低濃度組NF-κBp65陽性染色率、PGE2濃度和LXA4濃度均高于同批次高濃度治療組(P<0.05),高濃度治療組在第10天時(shí)陽性染色率、LXA4濃度已顯著下降,與對照組無明顯差異(P>0.05)。NF-κBp65、PGE2、LXA4在潰瘍愈合的過程中呈協(xié)同變化