湖北地區(qū)原發(fā)性先天性青光眼患兒CYP1B1基因突變分析.pdf

1、[目的]探討湖北地區(qū)漢族原發(fā)性先天性青光眼(PCG)患兒的CYP1B1基因突變情況，為基因診斷奠定基礎(chǔ)。 [方法]從協(xié)和醫(yī)院和武漢市兒童醫(yī)院收集到47例原發(fā)性先天性青光眼患兒的外周抗凝血。對(duì)這47例無關(guān)個(gè)體的PCG患兒及100例健康正常兒童進(jìn)行基因分析。(1)用苯酚-氯仿法從患兒和對(duì)照組的全血細(xì)胞中提取基因組DNA.。(2)參照文獻(xiàn)所報(bào)道的引物序列，聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction，PCR)分別擴(kuò)增C

2、YP1B1基因的第2，3外顯子。(3)應(yīng)用單鏈構(gòu)象多態(tài)性(singlestrandconformationpolymorphism，SSCP)-銀染色技術(shù)和變性高效液相色譜分析(DHPLC)技術(shù)檢測(cè)CYP1B1第2，3外顯子的突變情況。(4)基因測(cè)序。 [結(jié)果]7例患兒呈現(xiàn)CYP1B1基因的第三外顯子第385密碼子的第一個(gè)堿基C→T堿基點(diǎn)突變，致對(duì)應(yīng)的亮氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楸奖彼幔?0例患兒第407密碼子第一個(gè)堿基A→G堿基發(fā)生點(diǎn)突變，