先天性角化不良基因突變研究及其患者端粒長度測量.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 0 9 級碩士學(xué)位論文先天性角化不良基因突變研究及其患者端粒長度測量M u t a t i o nd e t e c t i o n i nD K C l g e n e r e s p o n s i b l e f o rd y s k e r a t o s i sc o n g e n i t a a n dT e l o m e r el e n g t h i np a t i e n t sw i t

2、h d y s k e r a t o s i sc o n g e n l t a 一課題來源： 廣東省科技計劃項目( 2 0 10 8 0 6 0 9 00 0 5 8 )專 業(yè) 名 稱學(xué)位申請人指 導(dǎo) 教 師答辯委員會主席答辯委員會成員皮膚病與性病學(xué)劉 香鄧偉平主任醫(yī)師論文評閱人 朱國興 副教授丁街生 副主任醫(yī)師2012 年0 5 月0 7 日 廣州中文摘要D C 和骨髓衰竭、再生障礙性貧血患者發(fā)現(xiàn)T E R C 和T E R T

3、 雜合子突變。T E R C和T E R T 均可導(dǎo)致端粒酶功能障礙和端?？s短。我們收集的一個D C 家系的2 0名家系成員中2 人為患者。先證者為1 6 歲男性，白4 歲起頸部、前胸、四肢末端出現(xiàn)網(wǎng)狀色素沉著。體格檢查：典型的舌粘膜白斑，軀干、四肢異常色素沉著，雙手足甲板萎縮變薄。血常規(guī)、胃鏡、胸片、心電圖、骨髓涂片及骨髓病理均未見明顯異常。根據(jù)其皮膚黏膜三聯(lián)征確診為D C 。此家系中2 個患者均為男性，父母無任何臨床表現(xiàn)，根據(jù)遺傳信

4、息考慮X 連鎖隱性遺傳可能性大，故選擇D K C l 進(jìn)行基因突變篩查。抽取患者和家系中健康成員、健康對照5 0 例外周血4 m l ，提取D N A 。采用O l i g o 6 ．0 軟件進(jìn)行引物設(shè)計。對D K C l 基因1 5 個外顯子及側(cè)翼進(jìn)行P C R 擴(kuò)增及D N A 測序。結(jié)果表明在D K C l 基因第1 2 號外顯子中發(fā)現(xiàn)一個新的突變位點(diǎn)：c ．11 9 2 C > G ( p ．L 3 9 8 V ) 。兩患

5、者均表現(xiàn)為此位點(diǎn)的突變，母親為同一位點(diǎn)的雜合突變，家系中正常人和健康對照組未發(fā)現(xiàn)此突變。第二部分先天性角化不良患者端粒長度測量在1 9 9 9 年，M i t c h e l lJ R 發(fā)現(xiàn)D C 細(xì)胞端粒酶R N A 水平下降，導(dǎo)致端粒酶活性降低和端粒的縮短。D C 發(fā)病機(jī)制可能為端粒酶功能的缺陷導(dǎo)致端粒長度維持的受損，這樣限制了上皮和血液中未分化干細(xì)胞的增殖能力。D y s k e r i n 不僅是s n o R N A s 成分

6、，而且是端粒酶R N A 所必需。D y s k e r i n 突變可減少端粒酶R N A蓄積j 降低端粒酶R N A 活性，導(dǎo)致端粒酶無法維持端粒長度。端粒酶復(fù)合體( T E R C 、T E R T 、朋印2 、N O P I O ) 幣Is h e l t e r i n ( T I N F 2 ) 多個基因的突變均可導(dǎo)致端粒的縮短。近1 0 年的部分研究表明D C 的主要致病原因?yàn)槎肆５貌坏奖Ｗo(hù)和維持。D K C l 和T I