脂多糖、鈣-鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ抑制劑預(yù)處理對(duì)TNBS誘導(dǎo)BALB-C小鼠結(jié)腸炎癥的影響.pdf

1、目的：
　　 探討脂多糖、鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ抑制劑KN62預(yù)處理對(duì)三硝基苯磺酸(TNBS)誘導(dǎo)的小鼠炎癥性腸病的影響，并對(duì)結(jié)腸組織內(nèi)IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類(lèi)分子的活性表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。
　　 方法：
　　 將禁食24小時(shí)、不禁飲的40只BALB/C雌性小鼠隨機(jī)分為四組，每組10只：分別為正常對(duì)照組(NC組)、模型對(duì)照組(UC組)、脂多糖組(LPS組)、鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶抑制劑組(KN62組)。

2、LPS組、KN62組、UC組小鼠分別預(yù)先腹腔注射LPS溶液(5mg/kg)、KN62溶液(25ng/小鼠)、生理鹽水，2小時(shí)后再予100mg/kg2，4，6-三硝基苯磺酸乙醇溶液(總體積100μl)灌腸；NC組予等體積生理鹽水結(jié)腸灌注。于造模后第7天處死小鼠，觀察指標(biāo)包括：疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)，結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)損傷評(píng)估(HI)，RT-PCR法檢測(cè)各組結(jié)腸粘膜中IL-6mRNA表達(dá)的水平，流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)腸固有層單個(gè)核細(xì)胞MHC-Ⅱ類(lèi)

3、分子活性的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 造模第7天，模型對(duì)照組(UC)的DAI、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)評(píng)分明顯高于正常對(duì)照組(NC組)(8.75±0.91vs0；10.92±0.93vs1.80±0.58，均p<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；LPS組DAI、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)評(píng)分高于UC組(10.68±1.16 vs8.75±0.91；13.54±1.12vs10.92±0.93，均P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；KN6

4、2組的DAI、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)評(píng)分低于UC組(4.36±0.52vs8.75±0.91；5.47±0.81vs10.92±0.93，均P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；UC組結(jié)腸粘膜的IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類(lèi)分子活性的表達(dá)都高于NC組(0.53±0.21vs0.14±0.12；4.97±0.23 vs1.26±0.11，均p<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)在LPS組高于UC組(0.71±0.25vs0.53±0.21

5、；7.32±0.14 vs4.97±0.23，均p<0.05)；KN62組低于UC組(0.38±0.13 vs0.53±0.21；2.38±0.16 vs4.97±0.23，均P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1.比較模型對(duì)照組小鼠和正常對(duì)照組小鼠疾病活動(dòng)度指數(shù)、結(jié)腸粘膜病理組織學(xué)損傷評(píng)估、IL-6mRNA及MHC-Ⅱ類(lèi)分子活性的表達(dá)等指標(biāo)，提示予5％TNBS乙醇溶液(100mg/kg)灌腸能夠誘導(dǎo)

6、出實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎動(dòng)物模型。
　　 2采用較大劑量脂多糖(LPS)干預(yù)后，該模型組小鼠結(jié)腸粘膜中IL-6的表達(dá)和結(jié)腸粘膜固有層單核細(xì)胞中MHC-Ⅱ類(lèi)分子活性的表達(dá)明顯增加，臨床癥狀加重，病理組織學(xué)表現(xiàn)顯著惡化，提示脂多糖可明顯增強(qiáng)組織細(xì)胞IL-6的轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而加重實(shí)驗(yàn)性小鼠結(jié)腸炎癥反應(yīng)。
　　 3采用鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶抑制劑(KN62)干預(yù)后，該模型組小鼠結(jié)腸粘膜中IL-6的表達(dá)下調(diào)，結(jié)腸粘膜固有層單核細(xì)胞中MHC-