孕早期HCMV感染對子代大鼠海馬鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ表達的影響.pdf

1、目的：探討HCMV先天性感染對子代大鼠海馬鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)表達的影響,為進一步研究HCMV先天性感染對子代大鼠海馬學習記憶損傷的機制及防治HCMV先天性感染導致的學習記憶障礙等神經(jīng)殘疾后遺癥提供科學的實驗依據(jù)。
　　方法：將SPF級SD見栓孕大鼠隨機分為實驗組與對照組,每組各10只。用HCMV致細胞病變效應(CPE)達+++~++++的病毒懸液接種第5代HELF細胞,待細胞變性95％以上,于妊娠第4天分別在實

2、驗組孕鼠腹腔內(nèi)注射HCMV懸液0.5 mL和對照組孕鼠腹腔內(nèi)注射等量的人胚成纖維細胞上清液。子代大鼠30~60天時制備海馬神經(jīng)細胞并熒光測定其游離鈣離子濃度([Ca2+]i)。取子代大鼠腦組織進行海馬的病理學觀察,及海馬CaMKⅡ的免疫組化和蛋白印跡實驗。最后進行統(tǒng)計學比較研究。
　　結果：與對照組比較,光鏡下實驗組子代大鼠腦組織海馬細胞帶細胞數(shù)有所減少,組織結構稀疏,細胞排列紊亂,神經(jīng)元退變消失;熒光測定結果顯示孕早期HCMV感

3、染實驗組子代大鼠海馬神經(jīng)細胞[Ca2+]濃度(153.47±37.26nmol/L)明顯高于對照組(102.32±21.33nmol/L),差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);光鏡下免疫組化反應陽性產(chǎn)物呈棕褐色,主要位于錐體細胞胞質(zhì)。實驗組子代大鼠CaMKⅡ免疫陽性細胞平均光密度值(0.2139±0.1125)顯著低于對照組(0.2511±0.1097),差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);實驗組子代大鼠CaMKⅡ免疫印跡平均光密度值(0.