銀屑病患者外周血microRNA差異表達(dá)的研究.pdf

1、分類號(hào)：R 7 5密 級(jí)：學(xué)位類別： 科學(xué)學(xué)位團(tuán) 專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼：10 06 2學(xué) 號(hào)：2 0 0 9 2 7 0 2學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)夭洱醬針矢垮 T I A N J I KM E D l C A L U N l V E R S I W碩士學(xué)位論文M A S T E R ’S D I S S E R T A T I O N論文題目：銀屑病患者外周血m i c r o R N A 差異表達(dá)的研究T IT L E T h e s t u

2、d y o fd i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e dm i c r o R N Ai np e r i p h e r a lb l o o do f p s o r i a s i sv u l g a r i s一級(jí)學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科：皮膚病與性病學(xué)論文作者：馬偉指導(dǎo)教師：徐麗敏天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二O 一三年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的：利用m i R N A 芯片

3、技術(shù)分析銀屑病患者與正常對(duì)照者外周血m i R N A s表達(dá)譜的差異，同時(shí)對(duì)差異表達(dá)的m i R N A s 所調(diào)控的靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè)和分子功能分析，以探討它們與銀屑病發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。方法：按照入選標(biāo)準(zhǔn)，選取進(jìn)行期尋常型銀屑病患者3 例，健康自愿者2例，分別進(jìn)入實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組。然后采集其血液樣本進(jìn)行總R N A 提取，質(zhì)量和純度鑒定；符合A f f y m e t r i xm i R N A 芯片技術(shù)要求后按照m i R N A

4、芯片標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行熒光標(biāo)記，雜交；然后利用A f f y m e t r i xG e n e C h i pS c a n n e r 3 0 0 0 激光共聚焦掃描儀對(duì)雜交結(jié)果進(jìn)行圖像掃描，同時(shí)A f f y m e t r i xG e n e C h i p O p e r a t i n gS o f t w a r eV e r s i o n l ．4 數(shù)據(jù)處理軟件讀取，處理數(shù)據(jù)；按照q - v a l u e ( ％)

5、 < 5 ，同時(shí)差異倍數(shù)控制在2 倍以上的標(biāo)準(zhǔn)篩選差異表達(dá)的m i R N A s ；利用H u m a n T a r g e t S c a n5 ．1 數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)差異表達(dá)的m i R N A s 進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)；運(yùn)用M A S 系統(tǒng)的P a t h w a y和G O 分類數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)預(yù)測(cè)的靶基因的分子功能進(jìn)行分析。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組相比，差異表達(dá)的m i R N A s 有5 個(gè)，其中，h s a - m i R ．3 6 3

6、 、h s a - m i R - 3 0 e 、h s a ．m i R ．1 9 2 表達(dá)上調(diào)，h s a - m i R ．4 2 3 ．5 p 和h s a - m i R ．7 2 0 表達(dá)下調(diào)，它們的長(zhǎng)度均集中在1 7 - - 一2 3 個(gè)核苷酸之間；5 個(gè)差異表達(dá)的m i R N A s 的預(yù)測(cè)靶基因達(dá)到4 9 3 個(gè)；P a t h w a y 分類結(jié)果顯示這些靶基因的功能涉及多種信號(hào)通路的傳導(dǎo)，多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，細(xì)

7、胞凋亡，細(xì)胞因子的相互作用等生物學(xué)過程；G O 分類結(jié)果顯示這些靶基因的分子功能主要是一些酶類、受體、細(xì)胞因子等分子的活性，生物學(xué)過程主要涉及D N A 的復(fù)制、R N A 的降解、細(xì)胞凋亡、血管生成、炎性反應(yīng)、免疫應(yīng)答、免疫細(xì)胞的增殖和分化等。結(jié)論：銀屑病患者外周血中存在差異表達(dá)的m i R N A s ，其中，h s a - m i R - 3 6 3 、h s a ．m i R ．3 0 e 、h s a ．m i R - 1 9