Tacrolimus對(duì)糖尿病大鼠腎臟巨噬細(xì)胞Toll樣受體2與4表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的:糖尿病腎病(Diabeticnephropathy,DN)是糖尿病微血管的嚴(yán)重并發(fā)癥之一,目前已逐漸成為導(dǎo)致終末期腎病的主要原因。DN的發(fā)病機(jī)制至今并不十分清楚,近年來(lái)炎癥學(xué)說(shuō)倍受關(guān)注,并認(rèn)為由巨噬細(xì)胞所介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致DN持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵因素。然而處于靜息或非活化狀態(tài)的巨噬細(xì)胞并無(wú)損傷作用,只有被激活的巨噬細(xì)胞才能有效發(fā)揮其炎癥效應(yīng)。Toll樣受體家族(TLRs)正是參與免疫炎癥反應(yīng)的一個(gè)關(guān)鍵因素,且認(rèn)為是介導(dǎo)免疫和炎癥

2、反應(yīng)的主體。Tacrolimus(FK506)作為一種新型的免疫抑制劑,臨床主要用于器官移植、風(fēng)濕免疫性疾病和難治性腎病等。我們先前的研究表明Tacrolimus可通過(guò)抑制鈣神經(jīng)蛋白(Calcineurin,CaN)及骨橋蛋白(0stepontin,OPN)等途徑對(duì)糖尿病腎臟產(chǎn)生保護(hù)作用;進(jìn)一步研究后發(fā)現(xiàn)Tacrolimus可抑制糖尿病腎臟巨噬細(xì)胞的激活,但具體機(jī)制不明。本研究將以巨噬細(xì)胞作為治療靶點(diǎn)來(lái)探討Tacrolimus對(duì)糖尿病腎

3、臟內(nèi)巨噬細(xì)胞Toll樣受體(Toll-likereceptor,TLR)2和TLR4表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。
　　方法:采用鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)大鼠糖尿病模型,隨機(jī)分為對(duì)照組(C)、模型組(Diabetesmellitus,DM)、Tacrolimus0.5mg·kg-1d-1給藥組及Tacrolimus1.0mg·kg-1d-1給藥組。Tacrolimus按0.5,1.0mg·kg-1d-1灌胃,正常組

4、和模型組每日給予等量溶劑。4周后檢測(cè)大鼠一般指標(biāo),包括血糖、體重、相對(duì)腎重(腎重/體重)(Relativeweightofkidney,RKW)、尿白蛋白排泄率(Urinaryalbuminexcretionrate,UAER)等變化,并應(yīng)用免疫組化單染及雙染技術(shù)檢測(cè)各組大鼠腎組織巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)(單核/巨噬細(xì)胞表面特異性標(biāo)志抗原ED-1+細(xì)胞),TLR2,TLR4,核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB-p-p65)表達(dá)情況。
　　結(jié)果:1.

5、各組大鼠生化指標(biāo)變化與對(duì)照組相比,模型組大鼠表現(xiàn)為血糖升高、體重下降、相對(duì)腎重增加,Tacrolimus各給藥組沒(méi)有防止大鼠血糖升高及體重下降。Tacrolimus0.5mg·kg-1d-1給藥組大鼠相對(duì)腎重較模型組有所下降,但未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Tacrolimus1.0mg·kg-1d-1給藥組大鼠相對(duì)腎重則明顯低于模型組(P<0.05)。模型組大鼠UAER明顯高于對(duì)照組(P<0.01),Tacrolimus給藥4周組大鼠UAER水平明

6、顯低于模型組(P<0.05,0.01)。2.各組大鼠腎組織巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與NF-κB-p-p65表達(dá)情況,腎臟巨噬細(xì)胞TLR2,TLR4表達(dá)情況模型組大鼠腎組織浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞數(shù)、NF-κB-p-p65+及TLR2+,TLR4+的巨噬細(xì)胞數(shù)明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。Tacrolimus0.5與1.0mg·kg-1d-1給藥組大鼠腎組織浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞數(shù)與模型組比較無(wú)明顯差異,而NF-κB-p-p65+細(xì)胞數(shù)及TLR2+,TLR4+的巨噬細(xì)胞