氧化低密度脂蛋白對巨噬細胞TOLL樣受體4的表達效應(yīng)及其機制的研究.pdf

1、第一章:泡沫細胞形成過程中TOLL樣受體4表達提高 目的:研究人單核細胞系在分化為巨噬細胞及轉(zhuǎn)化為泡沫細胞過程中TOLL樣受體4(TRL-4)表達的改變及其機制。 方法:體外培養(yǎng)人THP-1單核細胞系，加入佛波酯(PMA)培養(yǎng)48小時使其分化為巨噬細胞，后者再加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)進一步作用轉(zhuǎn)化為泡沫細胞；此過程中用免疫細胞化學(xué)、蛋白質(zhì)免疫印跡和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法，檢測TLR-4蛋白表達

2、及TLR-4mRNA表達的水平。 結(jié)論:單核細胞分化為泡沫細胞的過程中TLR-4轉(zhuǎn)錄水平的逐步上調(diào)可導(dǎo)致蛋白量合成不斷增加，從而有可能提高泡沫細胞在動脈粥樣硬化中的炎性反應(yīng)能力。 第二章:氧化低密度脂蛋白對巨噬細胞TOLL樣受體4的表達效應(yīng) 目的:研究低密度脂蛋白(LDL)氧化對人單核細胞源巨噬細胞TOLL樣受體4(TRL-4)表達的影響及其機制。 方法:體外培養(yǎng)人THP-1單核細胞系，加入佛波酯(PMA

3、)培養(yǎng)48小時使其分化為巨噬細胞，加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)或LDL，用免疫細胞化學(xué)、蛋白質(zhì)免疫印跡和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法，觀察脂蛋白氧化前后對巨噬細胞表達TLR-4蛋白及TLR-4mRNA的影響。 結(jié)論:LDL的氧化可能促進THP-1源巨噬細胞TLR-4轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)導(dǎo)致蛋白量合成增加；ox-LDL可能是動脈粥樣硬化中炎癥發(fā)生發(fā)展的原因之一。 第三章干擾素-r對泡沫細胞形成過程中TOLL樣受

4、體4表達的影響 目的:研究人單核細胞系在分化為巨噬細胞及轉(zhuǎn)化為泡沫細胞過程中干擾素-r對TOLL樣受體4(TLR-4)表達的影響及其機制。 方法:體外培養(yǎng)人THP-1單核細胞系，加入佛波酯(PMA)培養(yǎng)48小時使其分化為巨噬細胞，后者再加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)進一步作用轉(zhuǎn)化為泡沫細胞；此過程中用免疫細胞化學(xué)、蛋白質(zhì)免疫印跡和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法，檢測干擾素-r對TLR-4蛋白表達及TLR-4