多廿醇對低密度脂蛋白受體活性的影響.pdf

1、多廿醇(policosanol)，是一種從甘蔗蠟質(zhì)或蜂蜜蠟質(zhì)中提取并提純出來，以正二十八醇為主要功效成分的多個脂肪族伯醇的化合物。多項動物實驗和臨床試驗都證明多廿醇具有降低膽固醇和抗血小板的藥理作用，而且其毒副作用小，在體內(nèi)無明顯蓄積作用，可長期服用，在預(yù)防和治療高膽固醇血癥和冠心病方面展示了廣泛的臨床應(yīng)用前景[1,2,3]。一些研究已證明多廿醇可以通過抑制膽固醇合成限速酶3-羥-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-me

2、thylglutarylCoAreductase，HMG-CoAR)活性使體內(nèi)膽固醇合成減少，從而降低血中膽固醇水平。為了進(jìn)一步明確多廿醇是否存在降膽固醇的另外作用機(jī)理，本研究通過體內(nèi)和體外實驗方法探討了多廿醇對膽固醇代謝去路--低密度脂蛋白受體的影響作用。 目的:明確多廿醇對低密度脂蛋白受體(lowdensitylipoproteinreceptor，LDL-R)活性的影響，探討多廿醇對高膽固醇血癥患者降膽固醇作用的機(jī)理。

3、 方法：1.體外試驗：采用常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方法，觀察不同濃度多廿醇對體外培養(yǎng)的人單個核細(xì)胞LDL-R的直接作用。實驗共分六組，分別為陰性對照組、乙醇溶劑對照組、多廿醇高、中、低濃度組及陽性藥物洛伐他汀組。為使多廿醇的體外培養(yǎng)和體內(nèi)生化代謝過程齊同，加入含肝藥物代謝酶S9液共同培養(yǎng)。以上各組細(xì)胞在37℃50％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18小時，培養(yǎng)終止后收獲、洗滌細(xì)胞，用經(jīng)熒光探針1，1'-雙十八烷-3，3，3'，3'-四甲基吲哚羧花青-高氯酸鹽

4、標(biāo)記的低密度脂蛋白(Dil-LDL)對細(xì)胞進(jìn)行配體孵育后，采用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測受試細(xì)胞LDL-R的活性。 2.體內(nèi)試驗：按照2007年我國制定的中國成人血脂異常防治指南診斷標(biāo)準(zhǔn)，入選28例未用過調(diào)脂藥物的原發(fā)性高膽固醇血癥志愿者，隨機(jī)分為兩組：對照組13例，試驗組15例，對照組服用安慰劑淀粉片，試驗組服用多廿醇20mg·d-1，連服4周。在0周和4周末分別空腹抽取靜脈血5ml，分別進(jìn)行血脂、肝、腎功能、抗氧化指標(biāo)及單個

5、核細(xì)胞LDL-R活性的測定。 結(jié)果: 1.體外試驗：熒光鏡下可見多廿醇組和洛伐他汀組LDL-R活性細(xì)胞數(shù)比對照組和溶劑對照組明顯增多；流式細(xì)胞儀檢測單個核細(xì)胞LDL-R活性的結(jié)果顯示，與陰性對照組和溶劑對照組相比，洛伐他汀組和多廿醇各組LDL-R活性率顯著增高(P<0.01)；多廿醇在5～20μg·ml-1范圍內(nèi)可以增強(qiáng)人單個核細(xì)胞LDL-R的活性，并且具有明顯的量效關(guān)系。 2.體內(nèi)試驗：試驗組經(jīng)多廿醇20mg·

6、d-1治療4周后，(1)血脂變化為：與給藥前作自身比較，血清總膽固醇(totalcholesterol，TC)和低密度脂蛋白膽固醇(lowdensitylipoprotein-cholesterol，LDL-C)含量分別下降6.4％和11.6％(均P<0.05)；與對照組作組間比較，試驗組血清TC和LDL-C含量分別下降5.2％和12.0％(均P<0.05)；其余觀察指標(biāo)變化無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。(2)抗氧化功能變化為：與給藥

7、前作自身比較，血清超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathioneperoxidese，GSH-Px)活性分別提高43.9％和14.0％，而丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量下降35.3％(均P<0.05)；與對照組作組間比較，試驗組血清SOD活性提高29.6％、MDA含量下降35.7％(均P<0.05)。(3)LDL-R活性變化為：與給藥前作自身比較，服藥后