復(fù)方五味子素B對胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖抑制機(jī)制研究.pdf

1、本課題為黑龍江省自然基金資助課題(NO.TD2005-01)。目的是研究復(fù)方五味子素B對胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖抑制作用，并探討其胃癌抑制作用的分子機(jī)制，為復(fù)方五味子素B在胃癌防治方面的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 本研究分兩部分：第一部分復(fù)方五味子素B各組成藥及復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖抑制作用研究 分組：空白對照組加培養(yǎng)基、陰性對照組加2‰DMSO、陽性對照組加5-氟尿嘧啶(50μg/ml)、

2、藥物組-五味子乙素、蘆薈大黃素、黃芪多糖(每藥物組分三個劑量：終濃度分別為25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)；復(fù)方五味子素B低、中、高劑量組(以五味子乙素為標(biāo)準(zhǔn)，終濃度分別為25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)；孵育12、24、48小時；方法：采用MTT法觀察三種成分及復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖抑制作用；計(jì)數(shù)法觀察復(fù)方五味子素B對胃癌細(xì)胞分裂指數(shù)的影響；結(jié)果：①五味子乙素在25～100

3、μg/ml濃度范圍內(nèi)作用24小時，對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖均有明顯的抑制作用(P＜0.05)；②蘆薈大黃素在25～100μg/ml濃度范圍內(nèi)作用12小時，對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖沒有明顯的抑制作用，作用24小時和48小時時能起到顯著的抑制作用(P＜0.05)；③50μg/ml和100μg/ml的黃芪多糖作用24小時到48小時，對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖均有明顯的抑制作用(P＜0.05)。④25～100μ

4、g/ml復(fù)方五味子素B作用12～48小時，均能明顯抑制胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖和細(xì)胞分裂(P＜0.05)。 第二部分復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖抑制機(jī)制研究實(shí)驗(yàn)一復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞周期的影響 實(shí)驗(yàn)二復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖細(xì)胞核抗原PCNA表達(dá)的影響 實(shí)驗(yàn)三復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞周期蛋白cyclinD1mR

5、NA表達(dá)的影響 分組：空白對照組加培養(yǎng)基、陰性對照組加2‰DMSO、陽性對照組加5-氟尿嘧啶(50μg/ml)、復(fù)方五味子素B中、高劑量組；孵育24小時；方法：①采用流式細(xì)胞術(shù)觀察復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞周期的影響；②采用免疫組化法觀察復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖細(xì)胞核抗原PCNA表達(dá)的影響；③用RT-PCR法觀察復(fù)方五味子素B對人胃癌細(xì)胞株SGC-7901中細(xì)胞周期蛋白cyclinD

6、1mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果：①對細(xì)胞周期影響：與DMSO組相比，復(fù)方五味子素B(50～100μg/ml)能使胃癌細(xì)胞株SGC-7901的G0-G1期細(xì)胞增多，使S期和M期的細(xì)胞明顯減少，細(xì)胞增殖抑制率明顯增高(P＜0.05)；②對增殖細(xì)胞核抗原PCNA表達(dá)的影響：與DMSO組相比，復(fù)方五味子素B(50～100μg/ml)作用于胃癌細(xì)胞株SGC-7901，使其PCNA的表達(dá)明顯降低(P＜0.05)；③對細(xì)胞周期蛋白cyclinD1mRNA

7、表達(dá)的影響：與DMSO組相比，復(fù)方五味子素B(50～100μg/ml)作用于胃癌細(xì)胞株SGC-7901，使其CyclinD1mRNA的表達(dá)明顯降低(P＜0.05)。 結(jié)論：1)復(fù)方五味子素B各組成藥-五味子乙素、蘆薈大黃素、黃芪多糖能明顯抑制人胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖；2)復(fù)方五味子素B能明顯抑制人胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖；3)復(fù)方五味子素B抑制胃癌細(xì)胞株SGC-7901的增殖可能與其胃癌細(xì)胞影響細(xì)胞周期以及抑制