葡萄酒中赭曲霉素A的研究.pdf

1、赭曲霉素A(以下簡(jiǎn)稱(chēng)OTA)是一種由真菌(包括疣孢青霉菌，赭曲霉，以及炭黑曲霉)產(chǎn)生的生物毒素，其常見(jiàn)于谷物，谷物產(chǎn)品，水果，咖啡，葡萄干，葡萄酒和啤酒中。由于OTA對(duì)人體構(gòu)成了一種潛在的危害，國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)已將其定義為group2B類(lèi)致癌物。歐洲整體膳食評(píng)估中對(duì)食品中OTA進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)歐洲人從谷物中攝取到的OTA含量占到總攝取量的50％，而葡萄酒以13％僅次于谷物，排在第二位。歐盟(EU)、葡萄與葡萄酒組織(OI

2、V)等國(guó)際性組織對(duì)葡萄酒中赭曲霉毒素A進(jìn)行了限量，其限量標(biāo)準(zhǔn)為2μg/L。我國(guó)還沒(méi)有相關(guān)限量標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)內(nèi)也缺乏相關(guān)的研究。
　　 論文主要的研究結(jié)果如下：
　　 (1)高效液相-熒光法測(cè)定葡萄酒中赭曲霉素A方法的建立
　　 采用HPLC-FLD法測(cè)定葡萄酒中OTA時(shí)，線性良好，R2為0.9997：經(jīng)固相萃取小柱濃縮后，測(cè)定方法檢出限可達(dá)到0.002μg/L；回收率為85.7％-102.6％；RSD(n=5)為4.5

3、％。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)HPLC-FLD方法相對(duì)于UPLC-MS/MS具有更好靈敏度。
　　 (2)葡萄酒、葡萄酒生產(chǎn)過(guò)程中赭曲霉素A的測(cè)定與跟蹤
　　 采用建立的測(cè)定方法對(duì)葡萄酒樣進(jìn)行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)干紅葡萄酒中OTA含量明顯高于干白葡萄酒。對(duì)于過(guò)程樣測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，葡萄酒釀造過(guò)程中OTA的含量變化存在一定規(guī)律。
　　 (3)葡萄園中赭曲霉素A產(chǎn)生菌的分離與鑒定
　　 通過(guò)麥芽汁浸提物培養(yǎng)基(含氯霉素)與孟加拉紅氯

4、霉素培養(yǎng)基對(duì)葡萄園中的真菌進(jìn)行分離，并對(duì)其中的曲霉與青霉進(jìn)行了初步鑒定。共分離出29株真菌。
　　 (4)赭曲霉素A產(chǎn)生菌產(chǎn)毒素能力評(píng)估
　　 通過(guò)培養(yǎng)基對(duì)菌株進(jìn)行純培養(yǎng)，比較不同菌株的產(chǎn)OTA能力。炭黑曲霉產(chǎn)OTA能力明顯高于赭曲霉。通過(guò)比較實(shí)驗(yàn)室篩選菌株的產(chǎn)OTA能力后發(fā)現(xiàn)，黑曲霉(r-t-7與r-p-5)產(chǎn)OTA能力最為顯著，與赭曲霉產(chǎn)OTA能力相當(dāng)。
　　 (5)赭曲霉素A產(chǎn)生菌產(chǎn)毒素條件評(píng)估