環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶菌株發(fā)酵工藝優(yōu)化及酶固定化的研究.pdf

1、本文通過(guò)化學(xué)和物理誘變，獲得一株穩(wěn)定高產(chǎn)環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶菌株在此基礎(chǔ)上優(yōu)化了該菌株的搖瓶產(chǎn)酶條件及5L發(fā)酵罐發(fā)酵條件，并研究了菌株HAUV-4所產(chǎn)的轉(zhuǎn)移酶的固定化條件及固定化酶與游離酶的酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果分述如下： 1.以實(shí)驗(yàn)室保藏的一株嗜堿芽孢桿菌(Bacillus alcalophilus)IS為研究對(duì)象，其產(chǎn)CGTase酶活力為1764.7U/mL，做為后續(xù)誘變的出發(fā)菌株。 2.經(jīng)正交實(shí)驗(yàn)，確定菌株HAUV-4產(chǎn)酶的最

2、佳培養(yǎng)基配方。 3.在5L罐發(fā)酵罐中，研究了菌株HAUV-4的發(fā)酵規(guī)律并對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。 4.將經(jīng)過(guò)(NH4)2804初步分離的CGTase酶液采用海藻酸鈉固定的最適條件為：海藻酸鈉濃度7％(終濃度約為2.3％)；CaCl2濃度3％；海藻酸鈉體積與酶液量比例1:2；固定化時(shí)間2.5h。 5.固定化酶與游離酶相比最適溫度都在60"C左右，在pH5.0和pH9.0，固定化酶與游離酶的酶活力均出現(xiàn)兩個(gè)高峰。但酶經(jīng)