香菇深層發(fā)酵液中活性成分的分離提取及其應(yīng)用.pdf

1、香菇是一種營養(yǎng)豐富的食、藥用真菌。香菇多糖因其具有如降血脂、抗血栓、抗血小板聚集及抗腫瘤等生理活性而受到廣泛的關(guān)注。本論文通過香菇深層發(fā)酵來生產(chǎn)具有生物活性的多糖為目的，研究了香菇多糖的發(fā)酵生產(chǎn)、提取、分離純化及結(jié)構(gòu)的初步分析。研究了營養(yǎng)性因子對香菇深層發(fā)酵的影響，結(jié)果表明葡萄糖、玉米粉、豆餅粉有利于香菇菌體生長和胞外多糖的形成。進(jìn)一步的正交優(yōu)化實驗，確定了香菇深層發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖20g/L，豆餅粉(60目)20g/L，KH2PO4

2、2g/L，無機(jī)鹽MgSO4·7H2O0.5g/L。優(yōu)化發(fā)酵工藝條件為：初始pH5.5自然、接種量10％、種齡6d，溫度28℃、250mL搖瓶裝液量80mL的條件下，香菇深層發(fā)酵結(jié)果最佳，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行搖瓶發(fā)酵曲線測定，確定了香菇適宜發(fā)酵周期為144h，胞外粗多糖含量最高可達(dá)542mg/100mL，菌體生物量達(dá)8.41mg/100mL。香菇發(fā)酵液胞外多糖最佳提取工藝為：75％(V/V)的乙醇濃度沉淀，溫度為4℃，溶液pH值7.0時胞外粗多

3、糖得率為670mg/100mL發(fā)酵清液。香菇發(fā)酵液胞內(nèi)多糖最佳提取工藝為：組織搗碎法破壁處理、提取溫度90℃、料水比1:4、提取時間4h、提取次數(shù)2次，胞內(nèi)多糖的最高產(chǎn)率為14.73mg/50g濕菌絲體。香菇胞外粗多糖經(jīng)活性炭脫色，酶法和三氯乙酸正丁醇法脫蛋白，經(jīng)DEAE-纖維素柱進(jìn)行組別分離和Superdex200進(jìn)行分級分離，經(jīng)透析脫鹽冷凍干燥得到香菇多糖純品。含量最多的胞外多糖級分LEN1經(jīng)紅外光譜照射，證明其有多糖的特征吸收峰，