β-呋喃果糖苷酶菌株篩選工藝及酶的應(yīng)用研究.pdf

1、β-呋喃果糖苷酶廣泛地存在于生物界，不同微生物來源的β-呋喃果糖苷酶的性質(zhì)不同。黑曲霉、節(jié)桿菌、米曲霉等微生物能夠產(chǎn)生β-呋喃果糖苷酶，其分子由1～8個(gè)亞基所構(gòu)成，相對(duì)分子質(zhì)量為11 000～409 000D，其作用機(jī)理是將蔗糖的葡萄糖基與果糖基的β-呋喃果糖苷鍵斷裂，生成果糖與葡萄糖。果糖在酶的作用下進(jìn)一步聚合成功能性低聚糖。 大豆低聚糖中功能性因子(棉子糖、水蘇糖)與非功能性因子(蔗糖)共存。目前我國(guó)生產(chǎn)的大豆低聚糖產(chǎn)品中功

2、能性低聚糖的含量較低(30～40％)。本研究的目的在于用β-呋喃果糖苷酶作用于大豆低聚糖，通過酶改性將其中非功能性蔗糖轉(zhuǎn)化為功能性低聚糖，增加大豆低聚糖中功能因子的含量，提高大豆低聚糖的功能性。 本研究從一株節(jié)桿菌(Arthrobacter sp．10137)和一株黑曲霉(Aspergillus，niger 3.795)中篩選出高產(chǎn)β-呋喃果糖苷酶的菌株AspergiUus niger 3.795，并確定了該菌株的最佳培養(yǎng)條件為

3、溫度28℃，時(shí)間66～72h，振蕩速度為150轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)基初始pH值為6.0。最佳培養(yǎng)基成分為：玉米糖化液10Bx、蔗糖3％、蛋白胨0.35％、硫酸鎂0.034％、氯化鐵0.034％;采用乙醇法濃縮β-呋喃果糖苷酶的粗酶液，濃縮倍數(shù)為2.5倍。β-呋喃果糖苷酶的特性是：(1)在溫度=40℃時(shí)，β-呋喃果糖苷酶穩(wěn)定；(2)β-呋喃果糖苷酶在pH值5～7范圍內(nèi)穩(wěn)定；(3)Ag<'+>對(duì)酶有較強(qiáng)的抑制作用，Mg<'2+>、Zn<'2+>對(duì)酶