產(chǎn)冷活性β-半乳糖苷酶低溫菌株的篩選及產(chǎn)酶條件的優(yōu)化.pdf

1、乳糖酶，即β-半乳糖苷酶能將乳糖水解為半乳糖和葡萄糖，并具有半乳糖苷轉(zhuǎn)移作用，主要用于低乳糖乳制品的生產(chǎn)，用以解決乳糖不耐癥。隨著科學技術(shù)的迅猛發(fā)展，乳糖酶不僅在食品工業(yè)中有著廣泛的用途，而且在環(huán)境、醫(yī)藥、分析等領(lǐng)域中也扮演著越來越重要的角色。但目前工業(yè)上所用的乳糖酶最適反應溫度大多較高，從而提高了成本、也耗費了過多的能源。因此，尋找一種在較低溫度下具有高酶活的乳糖酶，對于降低成本，節(jié)約能源具有重要的應用價值。
　　 本文通過含

2、X-gal的篩選板在中國東北部油田附近土壤中分離出了一株產(chǎn)冷活性β-半乳糖苷酶的菌株，經(jīng)過形態(tài)學和16S rDNA比對，初步鑒定為變形斑沙雷氏菌屬（Serratia proteamaculans sp.），命名為Serratia proteamaculans sp.L3。該菌株在溫度（4℃-35℃），pH值（7.0-9.0），NaCl濃度（0.5％-3％）范圍內(nèi)生長活躍。最適生長溫度為25℃，最佳生長pH是7.5，最適生長的NaCl濃度

3、為1％。該菌株L3產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶為胞外酶，對粗酶液的酶活性及耐受性的研究發(fā)現(xiàn)，酶的最適反應溫度為22℃，最適反應pH為7.0，這與菌株的最適生長條件基本一致。
　　 除此之外，本文還利用表面響應分析法進行了產(chǎn)酶條件的優(yōu)化，結(jié)合單因子實驗，我們得到了理論上對菌株L3產(chǎn)酶最有利的培養(yǎng)條件：葡萄糖 1.0g/L；酵母粉 1.5g/L；（NH4）2SO4 0.1g/L；K2HPO4 0.15g/L；MgSO4 0.50g/L；Na