高產(chǎn)植酸酶菌株的選育和培養(yǎng)條件的研究.pdf

1、從200多個自然樣品中,分離、篩選出一株產(chǎn)植酸酶的曲霉,其植酸酶產(chǎn)量為5.868 IU/ml.經(jīng)鑒定后定名為黑曲霉Px.對黑曲霉Px原生質(zhì)體的形成和再生條件進行了研究.結(jié)果表明:在液體培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18小時的菌絲,用0.3％β-巰基乙醇與酶液同時處理,采用pH5.0的混合酶(蝸牛酶:纖維素酶=7:3);在34℃酶解2.5h;用0.7mol/L的氯化鈉為滲透壓穩(wěn)定劑時,原生質(zhì)體形成數(shù)和再生率均達到最高,分別為9.7×10<'5>個/ml和

2、28.2%.對黑曲霉Px的粗酶液的性質(zhì)作了研究:該酶作用的最適溫度為45℃;最適pH為5;該酶在55℃、pH為3~7時,相對酶活大于80%;金屬離子Zn<'2+>、AL<'3+>、Mn<'2+>、Cu<'2+>等對該酶有較強的抑制作用,而Mg<'2+>則有一定的激活作用.以黑曲霉Px為出發(fā)菌株,分別對其孢子和原生質(zhì)體進行誘變,選育出高產(chǎn)菌株P(guān)y的植酸酶產(chǎn)量為9.274 IU/ml,是出發(fā)菌株的1.58倍.利用Plackett-Burma

3、n設(shè)計篩選出黑曲霉Py培養(yǎng)基中的重要影響因素,然后利用正交試驗設(shè)計和響應(yīng)面分析法對這些重要因素進一步優(yōu)化,得出其優(yōu)化培養(yǎng)基成分為:蛋白胨0.3%,葡萄糖2.57%,(NH<,4>)<,2>SO<,4> 0.299%,MgSO<,4>·7H<,2>O 0.05%,MnSO<,4>·7H<,2>O 0.003%,FeSO<,4>·7H<,2>O 0.003%,KCl 0.05%,植酸鈉0.236%.在此基礎(chǔ)上對其產(chǎn)酶條件進行優(yōu)化的結(jié)果為:p