氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)研究.pdf

1、目的：目前認(rèn)為肥胖是一種慢性疾病，與糖尿病、心血管疾病關(guān)系密切。肥胖時(shí)，脂肪組織處于慢性炎癥狀態(tài)，細(xì)胞功能紊亂。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)在脂肪組織慢性炎癥狀態(tài)的發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色。肥胖患者血脂異常的重要特征之一是氧化型低密度脂蛋白(oxidized bw density lipoprotein，OX-LDL)水平增高。本研究旨在觀察ox-LDL誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞ERS相關(guān)標(biāo)

2、志物葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose-regulated protein78 kDa，GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein，CHOP)、磷酸化真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄起始因子2a(phosphorylation eukaryotic translational initiation factor2a，p-eIF2a)的表達(dá)情況，探討ox-LDL對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的誘導(dǎo)作用。
　　方

3、法：體外培養(yǎng)3T3-L1脂肪細(xì)胞，分別給予不同濃度ox-LDL(50ug/ml，100ug/ml，200ug/ml)及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激陽(yáng)性對(duì)照誘導(dǎo)劑衣霉素(tunicamycin，Tun)處理。用RT-PCR法檢測(cè)GRP78、CHOP mRNA的表達(dá)，篩選出最佳干預(yù)濃度，用最佳濃度的ox-LDL分別干預(yù)脂肪細(xì)胞6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)，用RT-PCR法檢測(cè)GRP78、CHOP mRNA表達(dá)，Western blot檢測(cè)GRP78、CHOP、

4、P-eIF2a蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：ox-LDL呈濃度依賴方式誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞GRP78、CHOP表達(dá)，其表達(dá)強(qiáng)度隨時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng)，24小時(shí)達(dá)高峰(P<0.05)。而p-eIF2a表達(dá)發(fā)生在OX-LDL作用早期(6小時(shí)，12小時(shí))，24小時(shí)表達(dá)有所下降。
　　結(jié)論：OX-IDL可誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，激活未折疊蛋白反應(yīng)信號(hào)通路。p-eIF2a，表達(dá)發(fā)生在OX-LDL作用早期，而GRP78、CHOP的表達(dá)強(qiáng)度