食品酶制劑復(fù)配研究用酶的制備.pdf

1、食品酶制劑占世界酶制劑市場份額約30％，是酶制劑中最大的應(yīng)用行業(yè)，在食品加工業(yè)中起著十分重要的作用。隨著科學(xué)的進(jìn)步和時代的發(fā)展，酶制劑工業(yè)正不斷推出新型酶制劑、復(fù)合酶制劑。食品復(fù)配酶制劑以其高效、節(jié)能、針對性強、作用效果明顯等優(yōu)點備受使用者推崇，但目前國內(nèi)復(fù)配酶制劑市場上生產(chǎn)的品種有限，還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足食品工業(yè)的需要，新型、高活力的復(fù)合酶制劑仍有待開發(fā)。酶制劑的復(fù)配研究需要高純度的單酶做基礎(chǔ)實驗，根據(jù)單酶對底物分子的酶解特性進(jìn)行復(fù)配組合的

2、快速篩選。本課題主要利用蛋白質(zhì)的分離純化技術(shù)和蛋白質(zhì)的含量與純度檢測技術(shù)，從兩種自制復(fù)合酶的發(fā)酵液和一種商品酶制劑中制備出了四種高純度的單酶，可作為食品酶制劑復(fù)配研究用酶，為酶制劑的復(fù)配研究奠定了基礎(chǔ)。
　　從枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中分離了氨肽酶。采用硫酸銨沉淀、Phenyl Sepharose疏水作用層析、Q Sepharose離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析等方法完成了氨肽酶的高純度單酶制備。經(jīng)過上述

3、四步純化步驟，回收率為15.28％，氨肽酶的比活力達(dá)到9066.67 U/mg，純化倍數(shù)為78.26。
　　從虎皮香菇發(fā)酵液中分離了漆酶。采用硫酸銨沉淀、DEAE Sepharose離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析等方法完成了漆酶的單酶制備。經(jīng)過上述步驟，回收率為48.9％，漆酶的比活力達(dá)到7827.33 U/mg，純化倍數(shù)為40.41，達(dá)到了SDS-PAGE電泳純。
　　從果膠酶商品酶制劑中分

4、離了聚半乳糖醛酸酶(PG)和果膠酯酶(PE)兩種單酶。采用透析、硫酸銨沉淀、DEAE Sepharose離子交換層析、Q Sepharose離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析等方法，使PG較好的分離出來并得以純化，純化后的回收率為48.23％，比活力達(dá)到72.93 U/mg，純化倍數(shù)為15.19，達(dá)到了SDS-PAGE電泳純;采用透析、硫酸銨沉淀、DEAE Sepharose離子交換層析和SephacrylS