動(dòng)物源性食品重要致病菌的調(diào)查及多重PCR檢測(cè)方法的建立.pdf

1、沙門(mén)氏菌（Salmonella spp）、單核細(xì)胞增生李斯特菌（Listeria monocytohenes）、大腸桿菌O157：H7(Escherichia coli O157：H7)和空腸彎曲桿菌(Campylobacter jejuni)，是引起人動(dòng)物源性食物中毒最常見(jiàn)病原菌。此四種病原菌在自然界中廣泛存在，同時(shí)也是畜禽體內(nèi)的共生菌。本課題研究目的：1、建立能夠快速檢測(cè)動(dòng)物源性食品中這四種病原菌的多重PCR方法；2、參照國(guó)標(biāo)法，結(jié)

2、合建立的多重PCR檢測(cè)方法對(duì)廣西南寧市售新鮮動(dòng)物源性食品中四種病原菌的污染情況調(diào)查；3、對(duì)2009-2010年送檢的病禽及市售新鮮動(dòng)物源性食品中檢出的沙門(mén)氏菌進(jìn)行血清型鑒定，分析動(dòng)物源性食品檢出的沙門(mén)氏菌的可能污染來(lái)源。
　　 參考空腸彎曲桿菌、大腸桿菌O157：H7、沙門(mén)氏菌和單核細(xì)胞增生李斯特菌的保守序列，設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物，優(yōu)化反應(yīng)條件，建立了檢測(cè)此四種病原菌的多重PCR方法。該方法的特異性試驗(yàn)表明，四對(duì)引物只能擴(kuò)增各自對(duì)應(yīng)的

3、病原菌DNA片段，而對(duì)其它非目標(biāo)病原菌則無(wú)擴(kuò)增。
　　 2009年至2010年間采集廣西南寧市6個(gè)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)及3個(gè)超市零售的新鮮動(dòng)物源性食品（包括牛肉、豬肉、雞肉、鴨肉、雞蛋）進(jìn)行四種病原菌的檢測(cè)。結(jié)果顯示，在總共315份檢測(cè)樣品中，沙門(mén)氏菌檢出率為20.9％(66/315)、空腸彎曲桿菌檢出率為7％(13/185)、單核細(xì)胞增生李斯特菌檢出率為3％(7/185)，未檢出O157：H7(0/185)。
　　 對(duì)檢出沙門(mén)氏菌

4、菌株進(jìn)行的血清型鑒定發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物源性食品最常見(jiàn)的血清型依次為豬霍亂沙門(mén)氏菌、德比沙門(mén)氏菌、雞沙門(mén)氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、傷寒沙門(mén)氏菌、鴨沙門(mén)氏菌等，而從臨床病禽中檢出的最常見(jiàn)血清型依次為雞沙門(mén)氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、爪哇那沙門(mén)氏菌和紐波特沙門(mén)氏菌。
　　 本課題研究結(jié)果證明，建立的四重PCR檢測(cè)方法能快速、高效地檢測(cè)食源性致病菌，可作為現(xiàn)用國(guó)標(biāo)法的補(bǔ)充。廣西南寧市售動(dòng)物源性食品致病菌以沙門(mén)氏菌污染為主，除動(dòng)物自身患病為主要的污染來(lái)源之