食品加工環(huán)境中單核增生李斯特菌生物被膜菌群結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、單核增生李斯特菌作為常見(jiàn)的食源性致病菌，致死率高達(dá)20-40％，被世界衛(wèi)生組織定義為四大食源性病原菌之一。在全球環(huán)境衛(wèi)生和食品安全備受關(guān)注的背景下，消毒劑在醫(yī)療衛(wèi)生、畜牧獸醫(yī)、食品、日化加工生產(chǎn)環(huán)境中的使用日益增加。隨著消毒劑選擇壓力的增大，病原微生物對(duì)其抵抗力也不斷在增加。生物被膜的形成是微生物對(duì)消毒劑產(chǎn)生抗性的重要原因之一，而自然界中的生物被膜往往都是以多種微生物共同存在的形式出現(xiàn)的，單核增生李斯特菌也不例外。生物被膜中單核增生李斯

2、特菌和共棲菌形成生物被膜，有助于細(xì)菌在消毒劑脅迫環(huán)境中存活下來(lái)。
　　在這項(xiàng)研究中，我們調(diào)查了食品加工設(shè)備中的單核增生李斯特菌陽(yáng)性生物被膜樣本，并鑒定出生物被膜樣品中的優(yōu)勢(shì)共棲菌，以了解該微生物菌群的生態(tài)背景特征。主要的研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.我們利用ISO11290標(biāo)準(zhǔn)來(lái)檢測(cè)和鑒定單核增生李斯特菌，并用16S rDNA和hly基因進(jìn)一步鑒別。結(jié)果顯示，100個(gè)來(lái)自4個(gè)不同的食品廠下水道環(huán)境樣品中，共有8個(gè)地漏樣品分離

3、出單核增生李斯特菌。
　　2.研究了8株單核增生李斯特菌對(duì)消毒劑的耐受性，其對(duì)苯扎溴銨的藥物敏感性MIC值為18～35μg/ml，可見(jiàn)消毒劑環(huán)境下食品加工設(shè)備中的單核增生李斯特菌對(duì)苯扎溴銨存在耐藥性。
　　3.采用16S rDNA基因克隆文庫(kù)法、T-RFLP和DGGE這三種分子技術(shù)相結(jié)合對(duì)食品加工環(huán)境地漏中的單增李斯特菌生物被膜樣品進(jìn)行菌群結(jié)構(gòu)分析。三種方法結(jié)果一致顯示:3Q、5Q、6Q的優(yōu)勢(shì)菌為假單胞菌(Pseudomon

4、as psychrophila)、假單胞菌（Pseudomonas sp.）和產(chǎn)酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）;嗜水氣單胞菌（Aeromonashydrophila）和克雷伯氏菌（Klebsiella sp.）分別是1-2、1-3和3-2的優(yōu)勢(shì)菌，嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)和產(chǎn)酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）是2-3的優(yōu)勢(shì)菌，嗜水氣單胞菌（Aeromonas hyd