BK通道基因敲除小鼠行為學(xué)評(píng)價(jià)及該通道與TRPV1通道在小鼠海馬神經(jīng)元中相互作用研究.pdf

1、目的：研究BK通道基因敲除小鼠的行為學(xué)表現(xiàn)，探究其在基礎(chǔ)水平與野生型小鼠的行為學(xué)差異。研究BK通道和TRPV1通道是否在小鼠海馬神經(jīng)元中形成復(fù)合體并在功能上相互偶聯(lián)從而調(diào)節(jié)神經(jīng)元的功能。
　　方法：觀察BK通道基因敲除小鼠的體型，稱量體重，對(duì)其進(jìn)行自發(fā)活動(dòng)、懸尾、強(qiáng)迫游泳、聽覺驚嚇反應(yīng)的前脈沖抑制（prepulse inhibition，PPI）和轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)評(píng)估，與野生型小鼠的相關(guān)行為學(xué)指標(biāo)進(jìn)行比較。采用細(xì)胞免疫熒光染色法對(duì)原代培養(yǎng)

2、的小鼠海馬神經(jīng)元上BK通道和TRPV1通道的表達(dá)和分布情況進(jìn)行檢測(cè)；以共轉(zhuǎn)野生型BK通道和TRPV1通道的HEK293T細(xì)胞裂解蛋白為陽性對(duì)照，通過免疫共沉淀的方法檢測(cè)小鼠海馬組織中的BK通道和TRPV1通道是否形成蛋白復(fù)合體；通過單細(xì)胞膜片鉗技術(shù)檢測(cè)原代培養(yǎng)小鼠海馬神經(jīng)元上BK通道和TRPV1通道之間的相互作用。
　　結(jié)果：BK通道基因敲除小鼠的體型較野生型小鼠小，體重較輕；自發(fā)活動(dòng)增加且中間區(qū)域的時(shí)長增加，不容易產(chǎn)生焦慮樣癥狀

3、；在懸尾和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的絕對(duì)不動(dòng)時(shí)間較野生型小鼠短；其PPI值較野生型小鼠高；在轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間明顯短于野生型小鼠，有運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力障礙。BK通道和TRPV1通道在小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞膜上共定位且二者形成蛋白復(fù)合物，TRPV1通道的特異性激動(dòng)劑辣椒素可以激活小鼠海馬神經(jīng)元上的BK通道。
　　結(jié)論：和野生型小鼠相比，BK通道基因敲除小鼠體重較輕，不容易焦慮，不容易抑郁，PPI值升高，運(yùn)行協(xié)調(diào)能力下降，有帕金森樣癥狀。BK通道和TRPV1通