痛覺受體TRPV1通道的濃度依賴性脫敏現(xiàn)象研究.pdf

1、TRPV1通道是一種非選擇性陽離子通道，在外周神經(jīng)痛覺感受中具有重要作用。辣椒素激活通道導(dǎo)致的鈣離子內(nèi)流可以使 TRPV1通道電流脫敏。PI(4,5)P2（4,5-二磷酸磷脂酰肌醇）被認為具有維持TRPV1通道活性的重要功能，現(xiàn)有的研究表明其水解在 TRPV1通道的鈣離子依賴性脫敏過程中具有重要作用。TRPV1通道在脫敏后仍然維持對激動劑的完全響應(yīng)，這體現(xiàn)了痛覺受體在痛覺感覺過程中具有適應(yīng)性。然而，對于在痛覺超敏過程中是否能夠產(chǎn)生脫敏程

2、度的變化，以及TRPV1通道脫敏過程中是否具有不同機制協(xié)同作用等問題，仍然沒有清晰的解釋。
　　我們通過提高通道脫敏過程中激動劑辣椒素的濃度，首先發(fā)現(xiàn)TRPV1通道脫敏程度與脫敏時激動劑濃度有關(guān)，過飽和濃度辣椒素激活通道引起鈣離子內(nèi)流會導(dǎo)致TRPV1通道脫敏程度增強，脫敏后通道失去對辣椒素刺激的完全響應(yīng)。若降低脫敏時鈣離子進入細胞內(nèi)的程度，TRPV1通道脫敏的速率和程度有明顯下降，表明通道脫敏的程度與胞內(nèi)鈣離子濃度有關(guān)。我們隨后通

3、過不同實驗，來檢驗胞內(nèi)信號通路如去磷酸化、磷酸肌醇水解以及細胞內(nèi)吞等機制是否對TRPV1的濃度依賴性脫敏程度具有作用。
　　TRPV1對辣椒素濃度響應(yīng)關(guān)系的分析，表明了PIP2水解會導(dǎo)致通道在正常脫敏過程中對辣椒素敏感性下降，而與增強的脫敏過程中TRPV1通道對辣椒素響應(yīng)的缺失無關(guān)，向胞內(nèi)補充PIP2并不能使衰減的響應(yīng)恢復(fù)。此外，TRPV1通道在不同程度的脫敏后狀態(tài)下與靜息狀態(tài)下的門控特性并未發(fā)生明顯變化。我們接下來檢驗了可能導(dǎo)致

4、TRPV1通道增強的脫敏作用的鈣離子依賴性機制，并排除了通道去磷酸化和細胞內(nèi)吞作用在此過程中的作用。
　　本研究發(fā)現(xiàn)了TRPV1通道脫敏程度具有激動劑濃度依賴性，并且在脫敏過程中鈣離子進入胞內(nèi)的程度對脫敏速率和程度都有影響。確定了PIP2水解機制在脫敏增強過程中導(dǎo)致通道對辣椒素敏感性降低的作用，而與增強的脫敏反應(yīng)后，通道對激動劑活性響應(yīng)缺失無關(guān)。研究 TRPV1通道脫敏的不同程度以及其中的決定機制對于闡明TRPV1通道在痛覺的可塑