1,25(OH)2D3對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維滑膜細(xì)胞IL-22介導(dǎo)的RANKL蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、背景：
　　類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis, RA）是一種以殘毀性關(guān)節(jié)炎為主要特點(diǎn)的自身免疫性疾病。骨和軟骨的破壞是RA致殘的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，破骨細(xì)胞在骨破壞中起著關(guān)鍵作用。其中細(xì)胞核因子кB活化因子配體（RANKL）的增加是破骨細(xì)胞分化的必要條件。1,25-(OH)2D3能顯著降低RA患者Thl7型細(xì)胞因子IL-17、IL-22、IL-6、TNF-α的水平。IL-22被認(rèn)為是促成Th17細(xì)胞病理學(xué)功能——相應(yīng)炎

2、癥反應(yīng)和組織破壞的主要因素。我科前期研究發(fā)現(xiàn)，RA患者血清RANKL水平明顯高于對(duì)照組；IL-22通過(guò)活化JAK-2/STAT-3和p38 MAPK信號(hào)通路來(lái)誘導(dǎo)RA患者成纖維滑膜細(xì)胞RANKL的表達(dá)，這種作用能被1,25-(OH)2D3在mRNA水平抑制。但1,25-(OH)2D3對(duì)RANKL蛋白的表達(dá)是否也有同樣的抑制作用，有待進(jìn)一步研究。
　　目的：
　　研究1,25-(OH)2D3是否能阻斷IL-22活化的JAK-2

3、/STAT-3和p38 MAPK信號(hào)通路，從而抑制RA患者成纖維滑膜細(xì)胞RANKL蛋白的表達(dá)，間接延緩RA骨破壞的進(jìn)程。為臨床RA的早期診斷和治療提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.進(jìn)行RA患者成纖維滑膜細(xì)胞的培養(yǎng)；
　　2.用rhIL-22、JAK-2/STAT-3通路抑制劑（AG490）、p38 MAPK通路抑制劑（SB203580）、1,25-(OH)2D3對(duì)4-7代的成纖維滑膜細(xì)胞干預(yù)處理，分為對(duì)照組、I

4、L-22組、IL-22+1,25-(OH)2D3組、IL-22+JAK-2/STAT-3通路抑制劑組、IL-22+p38 MAPK通路抑制劑組、IL-22+JAK-2/STAT-3通路抑制劑組+1,25-(OH)2D3組、IL-22+p38 MAPK通路抑制劑+1,25-(OH)2D3組，提取FLS細(xì)胞內(nèi)總蛋白并用Western Blot法檢測(cè)RANKL蛋白的表達(dá)量；
　　3.統(tǒng)計(jì)分析采用 SPSS17.0軟件。
　　結(jié)果：

5、
　　1.成功體外培養(yǎng)RA患者成纖維滑膜細(xì)胞至5代；
　　2.較對(duì)照組比，IL-22組RANKL蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯增加（P<0.05）；
　　3.較IL-22組比，IL-22+JAK-2/STAT-3通路抑制劑組、IL-22+p38 MAPK通路抑制劑組RANKL蛋白相對(duì)表達(dá)量均明顯減少（P<0.05）；
　　4.較IL-22組比， IL-22+1,25-(OH)2D3組RANKL蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯減少（P<0.

6、05）；
　　5. IL-22+1,25-(OH)2D3+JAK-2/STAT-3通路抑制劑組較IL-22+1,25-(OH)2D3組RANKL蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯增加（P<0.05）；
　　6. IL-22+1,25-(OH)2D3+p38 MAPK通路抑制劑組較IL-22+1,25-(OH)2D3組RANKL蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯增加（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1,25-(OH)2D3能夠阻斷IL-22活化