元胡止痛方有效組分的成藥性研究.pdf

1、目的：元胡止痛方主要由延胡索、白芷二味中藥組成，具有理氣、活血、止痛的功效，現(xiàn)代臨床發(fā)現(xiàn)對胃潰瘍有較好的療效。本文在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，主要從藥物化學(xué)、生物藥劑學(xué)、藥物動力學(xué)、藥效學(xué)、藥劑學(xué)等角度，探索組分中藥的可行性以及主要活性成分與元胡止痛方功效的關(guān)聯(lián)性，開展源于元胡止痛方的創(chuàng)新中藥復(fù)方的成藥性系統(tǒng)評價，為元胡止痛方的進一步深入研究開發(fā)提供依據(jù)和策略，也為其他經(jīng)典方劑的配伍、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機制及創(chuàng)新組分中藥的研究提供思路。

2、>　　方法：采用正交試驗方法，以有效部位含量及干膏率為考察指標，優(yōu)選延胡索總生物堿與白芷香豆素最佳提取工藝。利用生物堿易溶于酸水而難溶于堿水、香豆素類成分易溶于乙酸乙酯的特性，采用有機溶劑萃取法純化延胡索總生物堿和白芷香豆素有效部位，并初步建立了有效部位的質(zhì)量控制標準。根據(jù)組分中藥“基線等比增減法”，以不同比例延胡索總生物堿和白芷香豆素以及延胡索乙素和歐前胡素兩種活性成分組成的組分中藥為研究對象，采用乙醇致大鼠胃潰瘍疾病模型，從病變組織

3、形態(tài)學(xué)、潰瘍指數(shù)、潰瘍抑制率以及病理學(xué)角度優(yōu)選最佳配伍比例，從而闡明復(fù)方配伍合理性以及與原方給藥的關(guān)聯(lián)性。采用Caco-2細胞模型，通過對不同有效成分攝取和轉(zhuǎn)運過程的研究，考察有效成分及配伍的吸收機理。為提高有效組分的口服生物利用度，制備了有效成分的固體分散體，以溶解度及體外溶出度為考察指標，優(yōu)選最佳的載體材料及載藥比例，并通過大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)試驗對固體分散體的口服吸收進行了評價。
　　結(jié)果與結(jié)論：在8倍量60％乙醇，提取3次，

4、每次提取2h的條件下，延胡索總生物堿提取效果最佳。將延胡索提取液濃縮至含藥材0.3g/mL，加質(zhì)量分數(shù)為36%～38%的濃鹽酸將其pH調(diào)至2.0，加1倍量乙酸乙酯萃取2次，回收酸水層，加濃氨水將其pH值調(diào)至11.0，加1倍量乙酸乙酯萃取3次，回收有機層，即可得純度大于50%的延胡素總生物堿，延胡索乙素在其中的含量不少于55.6mg/g。在10倍75%乙醇，提取3次，每次提取3h的條件下，白芷香豆素提取效果最佳。將白芷提取液濃縮至含藥材2

5、g/mL，加2倍量石油醚萃取1次，回收水層，加2倍量乙酸乙酯萃取3次，回收有機層，即可得純度大于50%的白芷香豆素，歐前胡素在其中的含量不少于42.5mg/g。采用TLC法對中間體進行定性鑒別，結(jié)果顯示：特征成分色斑清晰、分離良好，二者含水量均不超過5.0%。指紋圖譜結(jié)果顯示：不同批次有效部位相似度良好。藥效學(xué)結(jié)果顯示：延胡索：白芷（2:1）、延胡索總生物堿：白芷香豆（9.4:5.3.）、延胡索乙素：歐前胡素（0.46:0.44）對無水

6、乙醇致大鼠胃潰瘍模型具有顯著的保護作用且作用效果相當，均優(yōu)于單獨給藥組，該結(jié)果表明：延胡索生物堿和白芷香豆素、TDE和IMP為元胡止痛方中的主要活性組分，同時也證明了元胡止痛方原方配伍的科學(xué)合理性。Caco-2細胞實驗結(jié)果表明：TDE、IMP的細胞吸收呈時間依賴性，并受到濃度梯度的影響，二者均以載體介導(dǎo)的主動轉(zhuǎn)運為主要方式被細胞吸收；當二者配伍后，TDE對IMP的吸收并無促進作用，IMP對TDE的吸收具有一定的促進作用，因此TDE與IM

7、P配伍后藥效優(yōu)于二者單獨給藥，很可能與TDE攝取量有關(guān)。選用PVP-K30為載體材料制備的固體分散體能使TDE與IMP的溶出度及溶解度顯著增加。采用差示掃描量熱法及X-射線衍射法對固體分散體進行物相分析，結(jié)果表明：TDE、IMP均以非晶體狀態(tài)存在于制劑中。選擇藥物載體比例1：1的固體分散體、原料藥、物理混合物對大鼠進行體內(nèi)藥代動力學(xué)實驗，結(jié)果表明，制備成固體分散體后TDE與IMP達峰的血藥濃度Cmax及AUC、t1/2z均有顯著提高（P