羥基喜樹堿混合膠束給藥系統(tǒng)的制備及評價.pdf

1、羥基喜樹堿(hydroxyl camptothecin，HCPT)是從我國特有的珙垌科喬木喜樹種子中分離提取的一種微量生物堿，是目前從喜樹中分離出的單體中抗癌作用最強的化合物之一，具有廣譜抗癌活性，如肺癌，卵巢癌，乳腺癌，胰腺癌等。關于羥基喜樹堿抗腫瘤作用的機制，早期研究表明，它在體外是一種強大的核酸合成抑制劑，并不是通過抑制核苷酸合成，亦不是通過影響DNA、RNA聚合酶，它對RNA的合成抑制是可逆的，對DNA的合成抑制較持久，對rRN

2、A生物合成的作用大于其他RNA的作用，對蛋白質的合成影響較小。
　　 羥基喜樹堿類藥物六元α-羥基內酯環(huán)的完整性是保證其為拓撲異構酶I抑制劑的必須結構，然而內酯型HCPT為水脂均難溶的藥物，難以制備成可達到臨床所需載藥量的制劑，并且根據(jù)pH不同，存在兩種結構。在pH低于5時，以具有活性的內酯形式存在；當pH近中性時，以低活性的開環(huán)羧酸鹽形式存在，因此嚴重影響羥基喜樹堿在臨床上的應用，目前臨床上通過堿化開環(huán)的方法將其制成鈉鹽水針或

3、粉針，雖增加了水溶性，但活性只有內酯形式的1/10，故療效降低且半衰期短因此，增加內酯型羥基喜樹堿在水中的溶解性，對提高其在臨床應用中的療效和降低毒性方面具有重要的意義。
　　 基于上述原因，為提高其水溶性及靶向性，降低毒副作用目前研究較多的有前體藥物、微球、乳劑、膠束、脂質體、固體脂質納米粒、非離子表面活性劑泡囊、納米粒等形式。本課題的目的是制備一種在體內循環(huán)系統(tǒng)中穩(wěn)定的、耐稀釋的膠束給藥系統(tǒng)。本實驗中以磷脂(PC)和D-α-

4、維生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)為材料，難溶性抗癌藥物HCPT為模型藥物，分別采用兩種方法制備羥基喜樹堿混合膠束：第一種首先將羥基喜樹堿制成磷脂復合物，然后與TPGS混合制備混合膠束；第二種直接制備羥基喜樹堿、PC、TPGS混合膠束。通過考察兩種混合膠束系統(tǒng)的載藥量、包封率等指標，對喜樹堿混合膠束給藥系統(tǒng)進行了綜合評價；通過研究膠束的體外釋放行為，體外抗腫瘤活性，驗證藥物的靶向性及緩釋性；選擇一種較優(yōu)給藥系統(tǒng)，為探索抗腫瘤藥

5、物靶向給藥治療的應用提供了理論和試驗依據(jù)。本課題的主要研究結果如下：
　　 1.含量測定方法的建立。標準曲線的建立，并且考查方法的精密度和回收率。建立了羥基喜樹堿的紫外含量檢測方法。
　　 2.考察先制備羥基喜樹堿磷脂復合物，然后與TPGS混合制備羥基喜樹堿混合膠束的方法。首先制備羥基喜樹堿磷脂復合物并確定其結構，然后與TPGS混合制備混合膠束。以載藥量和包封率為考察指標，采用單因素分析方法考察羥喜樹堿膠束制備的影響因素

6、。在對實驗結果進行分析的基礎上，對處方進行優(yōu)化，得到優(yōu)化處方。本實驗采用均勻設計法對膠束的處方進行優(yōu)化。選擇對混合膠束載藥量影響較大的四個因素作為考察對象，即TPGS的量、磷脂的量、水化介質的PH和水化體積這四個因素，每個因素有三個水平，最后得出：選擇羥基喜樹堿：磷脂=5mM：5mM(質量比=9mg：19mg)，TPGS為15mM(質量為113.5mg)，水化體積為5ml，水化介質的PH為4時為最優(yōu)處方，選擇最優(yōu)處方測定的載藥量為2.9

7、2％，包封率為44.3％。然后進行穩(wěn)定性考查和體外溶出度測定評價
　　 3.考察直接將HCPT、TPGS和卵磷脂混合制備膠束的方法。首先采用單因素分析方法考察羥基喜樹堿膠束制備的影響因素。在對實驗結果進行分析的基礎上，對處方進行優(yōu)化。以載藥量和包封率為考察指標，以均勻設計法對膠束的處方進行優(yōu)化，選擇TPGS的量、磷脂的量、水化介質的pH和給藥量四因素，每個因素有三個水平進行考查，最后得出選擇羥基喜樹堿11mg，PC11.4mg，