金黃色葡萄球菌腸毒B在變應(yīng)性鼻炎發(fā)病機(jī)制中作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:變應(yīng)性鼻炎(AR)是常見的耳鼻咽喉科疾病,也是常見的呼吸道變應(yīng)性疾病。變應(yīng)性鼻炎在全球范圍內(nèi)的患病率為10-25％,而在我國西部的部分地區(qū)其患病率高達(dá)34.31%,是嚴(yán)重危害人類健康和生活質(zhì)量的常見疾病。以變應(yīng)性鼻炎為代表的變應(yīng)性疾病的發(fā)病機(jī)制研究一直都是國內(nèi)外專家關(guān)注的熱點(diǎn)。一般經(jīng)典的認(rèn)識(shí)是,變應(yīng)原橋聯(lián)IgE,介導(dǎo)肥大細(xì)胞脫顆粒釋放炎性介質(zhì),引起不同程度的鼻黏膜炎癥,即I型超敏反應(yīng)是變應(yīng)性鼻炎發(fā)病的主要機(jī)制。但臨床上發(fā)現(xiàn),血清中

2、特異性IgE水平與癥狀嚴(yán)重程度并非完全相關(guān),可能存在非經(jīng)典途徑。近年來,細(xì)菌超抗原學(xué)說越來越得到廣大學(xué)者的重視?，F(xiàn)有研究證實(shí),細(xì)菌超抗原影響免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞(T淋巴細(xì)胞)和促炎細(xì)胞(樹突狀細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、上皮細(xì)胞等)的活性,誘導(dǎo)或促進(jìn)變態(tài)反應(yīng)性疾病的發(fā)生和發(fā)展。
　　 金黃色葡萄球菌腸毒素B(SEB)是由金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的一種超抗原,能直接連接抗原提呈細(xì)胞的MHCⅡ類分子外側(cè)和T細(xì)胞受體Vβ區(qū),同時(shí)非特異性激活體內(nèi)將近30%的

3、T細(xì)胞,而普通抗原僅能激活0.01%的T細(xì)胞。通過SEB超抗原的這種槽外連接,有利于被MHC呈遞的抗原肽更有效的與T細(xì)胞可變區(qū)結(jié)合,增強(qiáng)了變應(yīng)原的抗原性,促進(jìn)變態(tài)反應(yīng)性炎癥的發(fā)生、發(fā)展。另外,SEB可以作為變應(yīng)原活化特異性T細(xì)胞,繼而誘導(dǎo)抗原特異性IgE產(chǎn)生,發(fā)生經(jīng)典的變態(tài)反應(yīng)。金黃色葡萄球菌及其分泌的超抗原廣泛分布人類的皮膚和鼻腔,人們?cè)谌粘Ｉ钪薪佑|金葡菌超抗原的頻率極高,這就增加了特應(yīng)性個(gè)體罹患變態(tài)反應(yīng)性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。但尚無確切證據(jù)

4、說明SEB可作為變應(yīng)原誘導(dǎo)變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生。
　　 本研究應(yīng)用SEB反復(fù)鼻腔噴滴,觀察豚鼠打噴嚏、抓鼻等變應(yīng)性鼻炎典型癥狀,鼻黏膜中嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤情況,及血清SEB特異性IgE和IgG1的表達(dá),從而證明SEB作為變應(yīng)原,能夠誘導(dǎo)變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生。
　　 方法:將20只健康Hartley系豚鼠隨機(jī)分為2組:模型組和對(duì)照組,每組10只。模型組鼻腔噴滴SEB,每天1次,連續(xù)14天。每次噴滴前,用4%利多卡因(每側(cè)鼻孔20μ

5、1)先噴滴鼻腔,以抑制鼻腔纖毛運(yùn)動(dòng),延長變應(yīng)原在鼻腔停留時(shí)間。間隔7天后,以同樣劑量SEB噴滴鼻腔激發(fā),每周激發(fā)2次,連續(xù)激發(fā)3周。激發(fā)前,不再鼻腔應(yīng)用利多卡因。對(duì)照組以生理鹽水代替SEB進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在激發(fā)階段,對(duì)其噴嚏和抓鼻做動(dòng)態(tài)癥狀學(xué)觀察;間接ELISA法檢測血清SEB特異性IgE、IgG1和IgG2水平;HE染色觀察鼻腔組織的病理改變。
　　 結(jié)果:
　　 (1)模型組豚鼠出現(xiàn)典型的變應(yīng)性鼻炎癥狀,如頻繁噴嚏和抓鼻;

6、模型組豚鼠血清SEB特異性IgE和IgG1滴度明顯升高;模型組豚鼠的鼻腔黏膜出現(xiàn)以嗜酸性粒細(xì)胞為主的炎癥細(xì)胞浸潤,黏膜下間質(zhì)明顯水腫,小血管擴(kuò)張。
　　 (2)對(duì)照組豚鼠未出現(xiàn)變應(yīng)性鼻炎的典型癥狀,血清中無可檢測水平的SEB特異性IgE和IgG1,鼻黏膜未見明顯改變。
　　 (3)與對(duì)照組比較,模型組豚鼠鼻黏膜相關(guān)淋巴組織中IL-23mRNA表達(dá)下調(diào),鼻腔灌洗液中IL-17水平降低。
　　 結(jié)論:
　　

7、(1)采用反復(fù)鼻腔噴滴SEB的方法誘導(dǎo)出鼻腔黏膜變應(yīng)性炎癥,驗(yàn)證了SEB可以作為傳統(tǒng)的變應(yīng)原誘導(dǎo)變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生。
　　 (2)采用反復(fù)鼻腔噴滴SEB致敏,鼻腔連續(xù)激發(fā)的方法誘導(dǎo)出鼻腔變應(yīng)性炎癥,從而成功地建立了具有雙相反應(yīng)的變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型,為進(jìn)一步研究伴有金葡菌鼻腔攜帶的變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機(jī)制和遲發(fā)相反應(yīng)奠定了基礎(chǔ)。
　　 (3)模型組豚鼠Th17型細(xì)胞因子IL-23、IL-17的表達(dá)降低,而Th2細(xì)胞因子IL-4的