外周血T淋巴細(xì)胞間縫隙連接在高血壓炎癥中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：高血壓是一種多因素的慢性疾病，發(fā)病過程中伴隨低度炎癥性反應(yīng)。有研究發(fā)現(xiàn)，免疫細(xì)胞中存在縫隙連接通道，且在細(xì)胞增殖、活化及炎癥因子釋放過程中發(fā)揮重要作用，但縫隙連接是否參與高血壓炎癥反應(yīng)目前尚不清楚。本研究以自發(fā)性高血壓大鼠和原發(fā)性高血壓患者外周血T淋巴細(xì)胞作為研究對(duì)象，探討縫隙連接在高血壓炎癥反應(yīng)中的作用。
　　方法：動(dòng)物血樣實(shí)驗(yàn)：應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測T淋巴細(xì)胞亞群變化及CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞Cx40和Cx43表達(dá)；應(yīng)用

2、ELISA檢測血清IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ表達(dá)；體外原代培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，孵育縫隙連接阻斷劑Gap27，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測大鼠淋巴細(xì)胞中炎癥因子 IL-2和IL-6的表達(dá)。臨床血樣實(shí)驗(yàn)：應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測 T淋巴細(xì)胞亞群變化及CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞Cx40和Cx43表達(dá)；應(yīng)用ELISA檢測血清炎癥因子IFN-γ和TNF-ɑ表達(dá)；體外原代培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，縫隙連接阻斷劑Gap27干預(yù)處理，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測CD4+和

3、CD8+T淋巴細(xì)胞內(nèi)IFN-γ和TNF-ɑ的表達(dá)以及應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測細(xì)胞上清液中炎癥因子IFN-γ和TNF-ɑ的表達(dá)。
　　結(jié)果：動(dòng)物血樣實(shí)驗(yàn)：（1）SHR和WKY大鼠尾動(dòng)脈血壓差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；（2）流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)：SHR外周血CD4+/CD8+比值顯著高于對(duì)照組（P<0.01）；外周血CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞Cx40和Cx43表達(dá)顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；（3）ELISA檢測發(fā)現(xiàn)：SHR血清

4、炎癥因子IL-2、IL-4和IL-6水平顯著上調(diào)（P<0.05），且與Cx40和Cx43高表達(dá)呈顯著正相關(guān)（P<0.05）；（4）縫隙連接阻斷劑Gap27可顯著下調(diào)大鼠外周血淋巴細(xì)胞間IL-2和IL-6的表達(dá)（P<0.05）。臨床血樣實(shí)驗(yàn)：（1）原發(fā)性高血壓患者血壓顯著升高（P<0.05）；（2）流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)：原發(fā)性高血壓患者外周血CD4+/CD8+比值顯著增加（P<0.01）；外周血CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞Cx40和Cx43

5、表達(dá)顯著上調(diào)（P<0.01）；（3）ELISA檢測發(fā)現(xiàn)：原發(fā)性高血壓患者血清炎癥因子IFN-γ和TNF-ɑ表達(dá)水平顯著上調(diào)（P<0.05），且與Cx40和Cx43高表達(dá)呈顯著正相關(guān)（P<0.05）；（4）縫隙連接阻斷劑Gap27可顯著下調(diào)淋巴細(xì)胞內(nèi)以及細(xì)胞上清中炎癥因子IFN-γ和TNF-ɑ表達(dá)（P<0.05）。
　　結(jié)論：本研究結(jié)果表明高血壓伴隨炎癥反應(yīng)，機(jī)體外周血 T淋巴細(xì)胞亞群紊亂，促炎因子釋放增多，同時(shí)伴隨著構(gòu)成T淋巴細(xì)胞