整合素αIIbβ3介導(dǎo)的信號(hào)通路負(fù)反饋抑制血小板激活.pdf

1、整合素αⅡbβ3介導(dǎo)的“outside-in(outside-in)”的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)被廣泛的認(rèn)為是擴(kuò)大血小板激活反應(yīng)的，然而越來越多的證據(jù)表明“outside-in”的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在某些情況下可以抑制血小板的激活。為了弄明白整合素αⅡbβ3介導(dǎo)的“outside-in”信號(hào)通路對(duì)血小板激活的確切作用，我們通過血小板聚集儀，流式細(xì)胞儀，免疫印跡及免疫共沉淀等方法發(fā)現(xiàn)(1)整合素αⅡbβ3的抑制劑RUC2和RGD-peptide對(duì)低劑量CRP和TR

2、AP引起的血小板ATP釋放起促進(jìn)作用。說明整合素αⅡbβ3介導(dǎo)的“outside-in”信號(hào)通路抑制血小板ATP釋放。因?yàn)檠“遽尫艑?duì)血小板聚集起擴(kuò)大作用，所以整合素αⅡbβ3介導(dǎo)的“outside-in”信號(hào)通路具有負(fù)調(diào)控血小板聚集的作用。(2)在ADP為刺激劑的情況下，血小板聚集時(shí)Talin和Kindlin-3結(jié)合到整合素β3亞基上，當(dāng)血小板解聚時(shí)，Talin和Kindlin-3從整合素β3上脫落下來。加入RGD-peptide抑制

3、Talin和Kindlin-3從整合素αⅡbβ3上脫落。說明是整合素αⅡbβ3介導(dǎo)的“outside-in”信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)Talin和Kindlin-3從整合素β3上脫落。(3)當(dāng)刺激劑誘導(dǎo)整合素αⅡbβ3激活時(shí)，Akt發(fā)生磷酸化;而激活的整合素和配體纖維蛋白原結(jié)合，血小板發(fā)生聚集后，Akt發(fā)生去磷酸化，PI3K信號(hào)通路失活。加入整合素抑制劑RGD-peptide后，Akt的去磷酸化作用被抑制。說明Akt失活是由整合素αⅡbβ3“ou

4、tside-in”信號(hào)通路介導(dǎo)的。(4)我們加入SHIP-1抑制劑3AC后，Akt去磷酸化作用被抑制。說明SHIP-1參與調(diào)節(jié)Akt的去磷酸化作用。(5)SHIP-1的抑制劑3AC抑制血小板解聚，同時(shí)恢復(fù)ADP誘導(dǎo)的血小板ATP釋放，而且能消除整合素介導(dǎo)的從外到內(nèi)信號(hào)通路對(duì)血小板ATP釋放的抑制效應(yīng)。說明整合素介導(dǎo)的從外到內(nèi)的信號(hào)通路通過激活SHIP-1，進(jìn)而抑制血小板ATP的釋放，所以SHIP-1是血小板聚集的負(fù)調(diào)控蛋白。這些結(jié)果暗示