整合素介導(dǎo)的姜黃素納米膠束研究.pdf

1、姜黃素（Curcumin，Cur）是一種天然酚類物質(zhì)，具有抗癌防癌、抗氧化、抗炎、降低血糖、抑制新生血管生成、抗腫瘤遷移等藥理作用，基本無毒副作用。但Cur親水性及親脂性均差、溶解度極小、口服生物利用度低、生理pH值不穩(wěn)定等，限制了其臨床應(yīng)用。
　　 共聚物膠束是一種新型藥物載體，當(dāng)兩親性共聚物在水溶液中達(dá)到一定濃度后，通過分子間的氫鍵、靜電作用和范德華力等自發(fā)形成核殼結(jié)構(gòu)的膠束。其外殼親水，由疏水嵌段組成的內(nèi)核可以成為疏水藥物

2、儲(chǔ)庫。與其它載體系統(tǒng)相比，共聚物膠束具有載藥量高、粒徑小、長(zhǎng)循環(huán)、表面可修飾等優(yōu)點(diǎn)。本文采用生物可降解的材料聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PLA)為載體，制備Cur納米膠束制劑，以增加Cur的溶解度。
　　 利用腫瘤細(xì)胞表面過度表達(dá)的特異性受體，制備配體介導(dǎo)的主動(dòng)靶向制劑，從而達(dá)到定位給藥，是現(xiàn)在藥劑學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。腫瘤新生血管細(xì)胞和部分腫瘤細(xì)胞表面過度表達(dá)整合素受體，天冬氨酸-甘氨酸-精氨酸三肽(RGD)可以和整合素特異性結(jié)合，

3、從而產(chǎn)生配體-受體介導(dǎo)的細(xì)胞攝取或內(nèi)吞。本文以RGD為靶向因子，構(gòu)建RGD修飾的靶向自組裝納米膠束制劑，從而實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的靶向給藥與抗腫瘤血管生成的雙重治療作用。本課題以合成的新型RGD靶向材料RGD-PEG3000-PLA2000為載體，采用改良的薄膜分散法制備靶向聚合物膠束，并進(jìn)行理化性質(zhì)和抗腫瘤活性的相關(guān)研究，主要研究方法與結(jié)果如下:
　　 1.靶向材料的合成:以生物可降解的N-羥基琥珀酰亞胺活化的聚乙二醇-聚乳酸(NHS

4、-PEG3000-PLA2000)和RGD三肽為原料，利用酰胺鍵將RGD與PEG3000-PLA2000相連接合成了靶向共聚物材料RGD-PEG3000-PLA2000，HNMR與元素分析均證明RGD成功偶聯(lián)到PEG3000-PLA2000上。
　　 2.RGD靶向的載Cur納米膠束(Cur-RPP)的制備:采用改良的薄膜分散法（超聲-恒溫振蕩），在單因素篩選的基礎(chǔ)上，選用兩因素五水平的星點(diǎn)設(shè)計(jì)優(yōu)化處方工藝。以RGD-PEG30

5、00-PLA2000與MPEG2000-PLA20001∶9的質(zhì)量比制備靶向膠束Cur-RPP，得到的優(yōu)化處方載藥量（4.70±0.03）％，包封率（86.34±0.77）％，在透射電鏡下，膠束呈表面光滑的球形，平均粒徑約20nm，體外釋放符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)模型。物相研究(DSC，PXRD)表明Cur以晶體形式存在于膠束中。
　　 3.Cur-RPP的體內(nèi)外抗腫瘤活性評(píng)價(jià):體外溶血性研究結(jié)果顯示，膠束溶血率小于5％，符合注射給藥的要

6、求。采用MTT比色法研究了Cur-RPP的體外細(xì)胞毒性，表明該制劑可明顯提高Cur的細(xì)胞毒性，HUVEC的IC50值從16.66μg/mL降低到5.20μg/mL，B16的IC50值從14.20μg/mL下降到6.52μg/mL。細(xì)胞攝取研究發(fā)現(xiàn)，RGD靶向膠束在HUVEC細(xì)胞中有一定的靶向作用，Cur-RPP可以提高整合素受體過表達(dá)細(xì)胞的攝取。體內(nèi)抗腫瘤試驗(yàn)顯示，連續(xù)給藥30mg/kg的Cur膠束制劑，可顯著縮小腫瘤體積，并且對(duì)動(dòng)物無