α-ENaC mRNA表達(dá)水平及其編碼基因SCNN1A多態(tài)性與新生兒RDS相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：
　　國內(nèi)外多家新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房(neonatal intensive care unit，NICU)報道足月兒與近足月兒呼吸窘迫綜合征（respiratory distress syndrome，RDS）患病率明顯上升，且具備不同于早產(chǎn)兒RDS的臨床特征，足月兒與近足月兒RDS的病因、發(fā)病機(jī)制、預(yù)防和治療方法受到越來越多新生兒科醫(yī)師的重視。本課題擬對不同胎齡RDS患兒進(jìn)行肺表面活性物質(zhì)療效比較，以期觀察是否外源性肺表面活

2、性物質(zhì)替代治療對所有RDS患兒都有效，對前期提出的近足月/足月兒RDS病因可能不同于早產(chǎn)兒的設(shè)想進(jìn)行臨床驗(yàn)證。并利用HapMap數(shù)據(jù)庫和單體型相結(jié)合的方法，對SCNN1A基因所有SNP位點(diǎn)進(jìn)行分析，并從中挑選出與新生兒尤其是近足月/足月兒RDS發(fā)病密切相關(guān)的標(biāo)志性SNP位點(diǎn)。同時通過檢測不同胎齡正常新生兒和RDS患兒鼻腔上皮α-ENaC mRNA相對表達(dá)量，進(jìn)一步驗(yàn)證攜帶易感基因型的新生兒與α-ENaC mRNA表達(dá)及RDS發(fā)病之間的關(guān)

3、系。
　　方法：
　　1.不同胎齡呼吸窘迫綜合征（RDS）新生兒肺表面活性物質(zhì)替代治療療效比較
　　1.研究對象
　　收集2010年1月至2013年2月在第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院兒科NICU住院治療的168名RDS患兒，均接受外源性肺表面活性物質(zhì)替代治療。經(jīng)過進(jìn)一步篩選，最終入選135名RDS患兒，所有研究對象均為中國籍漢族。根據(jù)胎齡將其分為3組:組1(早產(chǎn)兒組）:胎齡＜35周(n=54);組2（近足月兒組）:35周

4、≤胎齡＜37周(n=35);組3（足月兒組）:胎齡＞37周(n=46)。
　　2.SCNN1A基因多態(tài)性與新生兒RDS的關(guān)聯(lián)性研究
　　3.α-ENaC mRNA表達(dá)水平分析及其與RDS相關(guān)性的初步研究
　　結(jié)果:
　　1.不同胎齡RDS新生兒肺表面活性物質(zhì)替代治療療效比較
　　1.1用肺表面活性物質(zhì)前后血?dú)饨Y(jié)果比較:
　　用肺表面活性物質(zhì)前三組患兒間PH值、PaO2、 PaCO2差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(

5、P＞0.05);給予肺表面活性物質(zhì)氣管內(nèi)滴入治療后六小時，胎齡＜35周早產(chǎn)兒組血?dú)庵笜?biāo)明顯改善:PH值、PaO2較治療前顯著上升，PaCO2較用藥后顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);35周≤胎齡＜37周的近足月兒組3項(xiàng)血?dú)庵笜?biāo)均無明顯改善(P＞0.05);而胎齡＞37周的足月兒組在用藥后6小時血?dú)庵笜?biāo)不僅無明顯改善，反而較用藥前更糟糕:PH值無顯著變化(P＞0.05)，PaO2顯著降低、PaCO2顯著升高(P＜0.05)。

6、r>　　1.2用肺表面活性物質(zhì)前后氧合參數(shù)比較:
　　用肺表面活性物質(zhì)前三組患兒間FiO2、 OI、PaO2/PAO2差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);用肺表面活性物質(zhì)治療6小時后，胎齡＜35周早產(chǎn)兒組氧合參數(shù)較用藥前明顯改善:FiO2顯著降低(P＜0.05)，PaO2/PAO2顯著升高(P＜0.05)，OI值無顯著變化(P＞0.05);而胎齡＞35周的近足月和足月兒組在用藥后氧合參數(shù)不僅無明顯改善，甚至較用藥前更糟糕:FiO2

7、和OI值均顯著升高(P＜0.05)，PaO2/PAO2無顯著變化(P＞0.05)。
　　1.3治療結(jié)局:
　　三組患兒氣管插管率、機(jī)械通氣時間以及存活率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);而住院時間和肺表面活性物質(zhì)重復(fù)使用率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。隨著胎齡的增加，住院時間逐漸縮短，而肺表面活性物質(zhì)重復(fù)使用率明顯增加。
　　2.SCNN1A基因多態(tài)性與新生兒RDS的關(guān)聯(lián)性研究
　　在總樣本中，X2檢驗(yàn)和

8、logistic回歸分析結(jié)果均提示僅位點(diǎn)rs4149570多態(tài)性與新生兒RDS發(fā)病密切相關(guān)(P＜0.05)，其中AA基因型是RDS發(fā)病的高危因素。亞組分析結(jié)果提示，在胎齡大于37周的亞組中，除了SNP位點(diǎn)rs4149570，位點(diǎn)rs7956915多態(tài)性也與RDS發(fā)病相關(guān)(P＜0.05)，兩個位點(diǎn)均提示僅突變基因型(AA)是新生兒RDS發(fā)病的高危因素;有趣的是，在胎齡小于37周的兩個早產(chǎn)兒亞組中，未發(fā)現(xiàn)與新生兒RDS發(fā)病相關(guān)的SNP位點(diǎn)(

9、P＞0.05)。此外，在總樣本中，根據(jù)RDS嚴(yán)重程度將RDS患兒分為4組，之前得到的兩個陽性SNP位點(diǎn)(rs4149570和rs7956915)均與RDS嚴(yán)重程度相關(guān)性無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.外源性肺表面活性物質(zhì)替代治療對于胎齡小于35周的早產(chǎn)兒RDS療效更佳，而近足月/足月兒并未取得同等療效;近足月/足月兒可能存在不同于早產(chǎn)兒RDS的病因和發(fā)病機(jī)制。
　　2.SCNN1A基因rs41495

10、70和rs7956915位點(diǎn)多態(tài)性可能是中國漢族新生兒尤其是足月兒RDS發(fā)病的重要易感因素，但與RDS嚴(yán)重程度無相關(guān)性。
　　3.正常新生兒鼻腔上皮α-ENaC mRNA表達(dá)量受胎齡的調(diào)控，隨著胎齡的增加，其表達(dá)量逐漸增加;而RDS患兒α-ENaC mRNA表達(dá)量與胎齡不相關(guān)，且顯著低于正常新生兒α-ENaC mRNA表達(dá)量。新生兒鼻腔上皮α-ENaC mRNA的相對表達(dá)量（內(nèi)參基因POLR2A）低于0.82可作為臨床預(yù)測RDS發(fā)