全蛋液中恩諾沙星藥物殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制.pdf

1、恩諾沙星作為第三代氟喹諾酮類藥物，在人類和獸醫(yī)醫(yī)學(xué)中有十分廣泛的應(yīng)用，可用于治療包括泌尿、呼吸道和胃腸道感染等多種疾病。但其在畜禽養(yǎng)殖中的不規(guī)范使用會提高病原微生物耐藥性、危害人體健康以及給公共衛(wèi)生安全帶來威脅。因此，我國農(nóng)業(yè)部頒布的235等公告中，對恩諾沙星的使用及限量做出了明確的確定，特別強(qiáng)調(diào)產(chǎn)蛋雞禁用，并配套了相關(guān)的檢測標(biāo)準(zhǔn)等，以確保農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。恩諾沙星作為獸藥殘留監(jiān)控計劃中重要的監(jiān)控參數(shù)，已列入農(nóng)業(yè)部全國及地方范圍內(nèi)水產(chǎn)、畜

2、禽等例行監(jiān)測、專項監(jiān)測計劃中，但近年來畜禽產(chǎn)品風(fēng)險監(jiān)測結(jié)果顯示，家禽等我國大宗畜禽產(chǎn)品中恩諾沙星等氟喹諾酮類藥物仍持續(xù)有一定程度檢出。因此，恩諾沙星也成為了當(dāng)前我國雞蛋等畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)控的重點(diǎn)。為確保監(jiān)測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，有效支撐政府監(jiān)管工作，保證測量結(jié)果可靠性、可比性、準(zhǔn)確性，急需研制相關(guān)純度及基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
　　1.針對全蛋液中恩諾沙星基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究，本論文首先開展了恩諾沙星純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制，以建立完整溯源鏈。實驗通過

3、紅外光譜法和質(zhì)譜法對候選物進(jìn)行定性，后采用兩種不同原理的方法-質(zhì)量平衡法和定量核磁法對候選物進(jìn)行純度定值，后進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性的監(jiān)測和考察，同時對整個純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制過程中的不確定度進(jìn)行評估。最終獲得恩諾沙星純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值準(zhǔn)確，均勻性和穩(wěn)定性均能達(dá)到技術(shù)要求，純度為997％。擴(kuò)展不確定度為04(k=2)，并成功申報為國家二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(GBW(E)090817)。
　　2.本論文建立了針對基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的高準(zhǔn)確度定值方法。以同位素標(biāo)

4、記恩諾沙星為內(nèi)標(biāo)，基于分散固相萃取前處理技術(shù)、結(jié)合高靈敏度三重四極質(zhì)譜分析技術(shù)、建立全蛋液中恩諾沙星殘留分析液相色譜-同位素稀釋質(zhì)譜法，準(zhǔn)確測量雞蛋中恩諾沙星藥物殘留含量。方法檢出限及定量限分別為05μg/kg和15μg/kg。在05μg/kg～100μg/kg內(nèi)線性良好，2μg/kg～20μg/kg濃度添加范圍內(nèi)回收率在95％-105％之間，可滿足基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值需求。
　　3.研制全蛋液中恩諾沙星藥物殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。對蛋雞

5、通過口服連續(xù)給藥5天，采集從給藥的第1天至給藥結(jié)束后的第9天，即14天內(nèi)的雞蛋，分析其殘留消除規(guī)律。針對符合濃度水平要求的雞蛋樣品原料，通過蛋液混合-均質(zhì)-封裝-輻照滅菌-封裝-超低溫保存等制備工藝，進(jìn)而獲得全蛋液基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物。采用已建立的同位素稀釋質(zhì)譜法，聯(lián)合多家實驗室對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行定值研究。同時系統(tǒng)全面的研究雞蛋基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的均勻性、穩(wěn)定性等關(guān)鍵技術(shù)，獲得研制結(jié)果如下.全蛋液中恩諾沙星藥物殘留基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特性量值及其擴(kuò)展不確