Ⅰ、Ⅲ型膠原在男性腹股溝疝患者腹直肌前鞘中的表達及分析.pdf

1、背景與目的：
　　 腹股溝疝是普外科的常見病、多發(fā)病,其患病率為3‰～5‰[1]。人們對于腹股溝疝發(fā)病機制的研究已有幾百年的歷史,曾試圖從解剖學基礎(chǔ)、鞘狀突未閉、精索脂肪瘤、腹內(nèi)壓增高等方面來解釋腹股溝疝的發(fā)病原因。但到目前仍未能找到腹股溝疝發(fā)生的確切因素。近年來有國外學者從生物化學的角度提出了膠原代謝紊亂可能是腹股溝疝發(fā)生的重要原因,該學說[2]認為:在腹股溝疝患者結(jié)締組織中,Ⅰ型膠原蛋白減少,Ⅲ型相對增多,兩種膠原蛋白比例降

2、低,導致膠原代謝紊亂,引起腹股溝疝的發(fā)生。這一學說目前基本得到了國內(nèi)外學者的認可。
　　 在臨床工作中發(fā)現(xiàn),隨著年齡的增大,腹股溝疝患者增多,特別是60歲以后男性患者發(fā)病率明顯增高。目前,在國內(nèi)外對膠原代謝與腹股溝疝患者年齡的關(guān)系研究報道甚少。本研究通過免疫組化的方法檢測腹股溝疝患者不同年齡組Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的含量,分析這兩種膠原在不同年齡組的表達水平,探討Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白代謝與年齡的關(guān)系,為腹股溝疝發(fā)生發(fā)展的病因研究及臨床治療

3、提供理論依據(jù)。本研究在國內(nèi)外尚屬首例。
　　 材料與方法：
　　 1.實驗設(shè)計
　　 實驗組:原發(fā)性腹股溝疝患者60例,根據(jù)不同年齡段設(shè)計為3組。其中實驗1組20例,年齡為50～59歲;實驗2組20例,年齡為60～69歲;實驗3組20例,年齡為≥70歲。
　　 對照組:無腹股溝疝患者20例,年齡為50～80歲。
　　 實驗組與對照組于2011年05月至08月同時取材于鄭州大學第一附屬醫(yī)院,均為男性

4、患者,取材部位為下腹部腹直肌前鞘,面積為10mm*5mm。取材后立即浸泡于10％福爾馬林液體中固定。
　　 排除標準:實驗組和對照組均排除正在接受激素或其他免疫抑制劑治療患者、化療患者、糖尿病患者、低蛋白血癥患者、局部炎癥史者、結(jié)締組織病患者等。
　　 2.實驗方法
　　 方法:采用免疫組化SP法。膠原含量用積分光密度值相對定量表示。
　　 試劑:兔抗人Ⅰ型膠原多克隆抗體(美國SANTACRUZ生物制劑公

5、司),兔抗人Ⅲ型膠原多克隆抗體(美國SANTA CRUZ生物制劑公司),SP9000試劑盒(北京中杉生物工程公司),DAB試劑盒(北京中杉生物工程公司)。
　　 3.統(tǒng)計學處理
　　 所得結(jié)果以均數(shù)士標準差(x±s)表示。統(tǒng)計學分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包。兩組均數(shù)的比較采用t檢驗,兩組以上均數(shù)的比較采用單因素方差分析(ANVOA)。P值<0.05,差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.Ⅰ型膠

6、原蛋白的表達:
　　 對照組為156.02±11.37。
　　 實驗1組為135.04±2.57,較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.005<0.05)。
　　 實驗2組為128.77±1.85,較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.001<0.05)。
　　 實驗3組為112.46±7.23,較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000<0.05)。
　　 實驗1組>實驗2組

7、>實驗3組。各實驗組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。
　　 實驗組(60例)與對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.001<0.05)。
　　 2.Ⅲ型膠原蛋白的表達:
　　 對照組為116.21±7.80。
　　 實驗1組為128.97±3.46,較對照組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.032<0.05)。
　　 實驗2組為132.58±2.41,較對照組明顯增高,差異有

8、統(tǒng)計學意義(P=0.001<0.05)。
　　 實驗3組為149.97±6.39,較對照組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.016<0.05)。
　　 實驗1組<實驗2組<實驗3組。各實驗組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。
　　 實驗組(60例)與對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.023<0.05)。3.Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例:
　　 對照組為1.35±0.12。
　　 實

9、驗1組為1.05±0.02,較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.021<0.05)。
　　 實驗2組為0.97±0.02,較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.025<0.05)。
　　 實驗3組為0.75±0.06,較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.001<0.05)。
　　 實驗1組>實驗2組>實驗3組。各實驗組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。
　　 實驗組

10、(60例)與對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.018<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.腹股溝疝患者腹直肌前鞘中隨著年齡的增大,Ⅰ型膠原蛋白逐漸減少,Ⅲ型膠原蛋白逐漸增高,Ⅰ/Ⅲ型膠原比例下降,膠原代謝紊亂加重,可能是老年患者年齡越大,腹股溝疝發(fā)病率越高的原因。
　　 2.本實驗表明,腹股溝疝患者存在著明顯的膠原代謝紊亂。據(jù)此可以推斷,利用自身組織的傳統(tǒng)疝修補術(shù)不是理想的手術(shù)方式,采用人工材料的無張力修補