瓜蔞含藥血清及彎齒琵甲對Hela細胞增殖抑制作用的研究.pdf

1、癌癥是威脅人類健康的常見病及多發(fā)病，然而，臨床常用的化學(xué)合成藥物給患者帶來嚴重的不良反應(yīng)和明顯的毒副作用，因此，開發(fā)天然抗腫瘤藥物越來越受到人們重視。
　　 瓜蔞是栝樓或雙邊栝樓的成熟果實，是抗癌中藥復(fù)方中常見的藥物，為了明確瓜蔞水煎劑對腫瘤細胞增殖的影響，本實驗利用血清藥理學(xué)方法制備高、中、低3種劑量的瓜蔞含藥血清，分別處理Hela細胞24 h和48 h，MTT 法檢測該含藥血清對Hela細胞生長的抑制作用，Wright's-

2、Giemsa 染色和AO-EB 染色法觀察凋亡細胞的形態(tài)學(xué)變化，利用DNA 瓊脂糖凝膠電泳從分子水平檢測其對腫瘤細胞的影響。結(jié)果表明，不同劑量的瓜蔞含藥血清均對Hela細胞的增殖有抑制作用，且呈劑量時間依賴關(guān)系，其中，高劑量組瓜蔞含藥血清對Hela細胞的抑制率最大，20％的高劑量瓜蔞含藥血清在24h、48h的抑制率能分別達到36.4％和48.2％，說明瓜蔞具有抑制宮頸癌Hela細胞增殖和誘導(dǎo)細胞凋亡的作用。
　　 彎齒琵甲(Bl

3、aps femoralis)是擬步甲科(Tenebrionidae)琵甲族(Blaptini)琵甲屬(BlapsFabricius,1775)的一個優(yōu)勢昆蟲，民間長期用于治療肺氣腫、風(fēng)濕、腫瘤等疑難雜癥。
　　 本研究首先利用血清藥理學(xué)的方法制備彎齒琵甲含藥血清，采用上述方法研究彎齒琵甲對Hela細胞增殖的抑制作用。結(jié)果顯示彎齒琵甲含藥血清能夠抑制腫瘤細胞增殖，且呈時效、量效關(guān)系，其中，20％琵甲高濃度含藥血清在24h和48h的

4、抑制率分別能達到23.4％和37.3％。
　　 為了進一步分析彎齒琵甲抗腫瘤作用的有效成分，本研究采用硫酸銨沉淀法得到彎齒琵甲粗蛋白提取液，進行體外實驗。倒置熒光顯微鏡下觀察凋亡細胞形態(tài)，DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測凋亡細胞DNA 斷裂情況，Annexin V-FITC/PI 雙染法定量檢測凋亡細胞以及Western-blot 法檢測Caspase-3蛋白表達的情況。結(jié)果顯示彎齒琵甲粗蛋白能夠誘導(dǎo)細胞凋亡，15m g ﹒mL-1的彎