唑來膦酸聯(lián)合甲氨蝶呤對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖抑制作用研究.pdf

1、目的： 1、觀察第三代二膦酸鹽類藥物唑來膦酸(zoledronic acid, ZOL)及甲氨蝶呤(Methotrexate, MTX)單用在體外對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞株MG63生長(zhǎng)的影響。 2、進(jìn)一步研究唑來膦酸與甲氨蝶呤合用對(duì)MG63細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制是否具有協(xié)同作用。為下一步的試驗(yàn)或臨床治療提供依據(jù)。 方法： 本試驗(yàn)分為單一用藥試驗(yàn)、聯(lián)合用藥試驗(yàn)、細(xì)胞周期檢測(cè)三個(gè)階段,采用噻唑鹽(MTT)比色法。第一階段,測(cè)定

2、單一使用不同濃度的唑來膦酸與甲氨蝶呤分別在48h, 72h, 96h對(duì)MG-63細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用,得出結(jié)果后計(jì)算IC50值,為第二階段聯(lián)合用藥提供參考。第二階段,以適宜配比的唑來膦酸與甲氨蝶呤聯(lián)合應(yīng)用,測(cè)定其在48h, 72h, 96對(duì)MG-63細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。第三階段,采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)周期。 結(jié)果： 第一階段的單藥試驗(yàn)結(jié)果顯示唑來膦酸與甲氨蝶呤對(duì)骨肉瘤MG63細(xì)胞均有不同程度的生長(zhǎng)抑

3、制效應(yīng)。都有時(shí)間-效應(yīng)、濃度-效應(yīng)關(guān)系。相比之下唑來膦酸作用的時(shí)間、濃度依賴性更明顯。唑來膦酸對(duì)MG63細(xì)胞作用72h的IC50值為9.39 μmol/L,甲氨蝶呤對(duì)MG63細(xì)胞作用72h的IC50值為IC50值為50.99mg/L。第二階段,聯(lián)合用藥試驗(yàn)結(jié)果顯示單藥唑來膦酸組劑量為10μmol/L時(shí),MG63細(xì)胞凋亡率分別為48.95％,單用甲氨蝶呤(1、10、100mg/L)時(shí)細(xì)胞凋亡率為37.68％、45.93％、52.418％,

4、當(dāng)唑來膦酸(10μmol/L)聯(lián)合甲氨蝶呤(1、10、100mg/L)時(shí).MG63細(xì)胞的凋亡率分別為51.96％、66.77％、69.23％,聯(lián)合用藥組與單藥組相比差異有顯著性(P<0.05)。第三階段試驗(yàn)顯示唑來膦酸可將細(xì)胞周期阻滯在S期,并可引起細(xì)胞凋亡。 結(jié)論： 唑來膦酸與甲氨蝶呤均對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞株MG63有生長(zhǎng)抑制作用,均呈時(shí)間、劑量依賴關(guān)系。唑來膦酸可增強(qiáng)骨肉瘤MG63細(xì)胞對(duì)甲氨蝶呤的敏感性,兩者合用有協(xié)同作用